Anticorpo Monoclonal Anti-PKR/EIF2AK2 para WB, IF/ICC, ELISA - P19525

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de PKR/EIF2AK2

• PKR/EIF2AK2 é uma serina/treonina-proteína quinase dependente de RNA dupla fita induzida por interferon que também exibe atividade de tirosina-proteína quinase, desempenhando um papel fundamental na resposta imune inata contra infecções virais (PubMed:18835251, PubMed:19189853, PubMed:19507191). Referências relacionadas: PMID:18835251 PMID:19189853 PMID:19507191
• Ela fosforila a subunidade α do fator de iniciação da tradução eucariótica 2 (EIF2S1/eIF-2α) após ativação por dsRNA viral, levando à inibição global da síntese proteica e à tradução preferencial de mRNAs de resposta ao estresse, como o ATF4, suprimindo assim a replicação viral (PubMed:19189853, PubMed:21123651, PubMed:22948139). Referências relacionadas: PMID:19189853 PMID:21123651 PMID:22948139
• Exibe atividade antiviral contra um amplo espectro de vírus de DNA e RNA, incluindo o vírus da hepatite C (HCV), o vírus da hepatite B (HBV), o vírus do sarampo (MV) e o herpes simplex vírus 1 (HHV-1) (PubMed:11836380, PubMed:19189853, PubMed:19840259). Referências relacionadas: PMID:11836380 PMID:19189853 PMID:19840259
• Além do controle da tradução, a PKR modula diversas vias de sinalização (quinase p38 MAP, NF-κB, sinalização de insulina) e fatores de transcrição (JUN, STAT1, IRF1) para regular a expressão de genes de citocinas pró-inflamatórias e interferon (PubMed:22948139, PubMed:23084476, PubMed:23372823). Referências relacionadas: PMID:22948139 PMID:23084476 PMID:23372823
• A localização subcelular inclui o citoplasma, o núcleo e a região perinuclear, com alta expressão específica de tecido no timo, baço e medula óssea; níveis elevados são observados em carcinomas de mama e cólon, correlacionando-se com a progressão tumoral.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação, fosforilação e ubiquitinação (ligação isopeptídica), contribuindo para sua regulação sob estímulos de estresse e imunológicos.
• Contém domínios de ligação a RNA e motivos de quinase, classificando-o como uma transferase de ligação a ATP com atividade dupla de serina/treonina e tirosina quinase, essencial para a defesa antiviral e a dinâmica dos grânulos de estresse.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo sintético do aminoácido 450 ao 551, uma região dentro do domínio quinase; considere isso ao avaliar a especificidade do epitopo e o potencial reconhecimento de isoformas.
• Este anticorpo é validado para Western blotting (WB), imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC) e ELISA; as diluições de trabalho ótimas devem ser determinadas empiricamente para cada aplicação e tipo de amostra.
• Como a PKR é uma proteína induzida por interferon, o pré-tratamento das células com interferon tipo I ou mimetizantes de infecção viral pode melhorar a detecção em certos modelos experimentais.
• O peso molecular previsto da PKR é de 62 kDa, mas modificações pós-traducionais (por exemplo, fosforilação) podem causar ligeiros desvios; inclua controles positivos adequados (por exemplo, lisados de HeLa ou A549 tratados com interferon).
• A reatividade cruzada é confirmada para amostras humanas; para outras espécies, recomenda-se o alinhamento de sequência antes do uso, pois a reatividade cruzada não é garantida.

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