Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-PLC gama 1 (PLCG1) para WB, ELISA - P19174

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PLCG1

• PLCG1 codifica a fosfolipase C gama-1, uma enzima chave que hidrolisa o fosfatidilinositol 4,5-bisfosfato (PIP2) para gerar os segundos mensageiros diacilglicerol (DAG) e inositol 1,4,5-trisfosfato (IP3), regulando assim a sinalização intracelular de cálcio e proteína quinase C.
• A proteína é ativada a jusante de receptores tirosina quinase (ex.: PDGFRA, PDGFRB, EGFR, FGFRs) e desempenha um papel crítico na transdução de sinal mediada por fatores de crescimento, ligando receptores de superfície celular a cascatas a jusante.
• PLCG1 participa da reorganização do citoesqueleto de actina e da migração celular, e se localiza em estruturas celulares dinâmicas incluindo lamelípodes e dobras de membrana. Referências relacionadas: PMID:17229814
• Além de sua atividade lipásica, a PLCG1 funciona como fator de troca de nucleotídeo guanina (GEF) para a dynamina-1 (DNM1), facilitando a dissociação do GDP e aumentando a endocitose dependente de DNM1.
• A proteína contém domínios regulatórios SH2 e SH3 que mediam interações com proteínas contendo fosfotirosina e motivos ricos em prolina, contribuindo para sua montagem em complexos de sinalização.
• Modificações pós-traducionais como fosforilação (em resíduos de tirosina e serina) e acetilação modulam sua atividade e interações; o splicing alternativo gera múltiplas isoformas.
• PLCG1 é expressa de forma ubíqua e está implicada em vários contextos de doenças, incluindo cânceres e distúrbios genéticos, onde a sinalização aberrante por essa via impulsiona processos patológicos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma região entre os aminoácidos 710–832 da PLCG1 humana, que se encontra dentro do domínio catalítico; essa região é altamente conservada entre humano, camundongo e rato, o que sustenta a reatividade cruzada observada.
• Para Western blot, considere usar lisados de células inteiras de linhas celulares humanas comumente utilizadas (ex.: HeLa, Jurkat, A431), onde a PLCG1 é expressa endogenamente em níveis moderados; uma banda de aproximadamente 149 kDa é esperada.
• Ao desenvolver um ensaio de ELISA, valide o anticorpo nos formatos direto e de captura usando proteína recombinante ou alvo nativo; observe que a reatividade do anticorpo pode ser influenciada pela conformação da proteína e pela preparação da amostra.
• Otimize as condições de bloqueio e lavagem para minimizar o fundo, já que o anticorpo é monoclonal de coelho; é recomendado realizar experimentos de titulação para cada nova aplicação.

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