Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-PLD4 para WB, ELISA - Q96BZ4

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PLD4

• A PLD4 (Phospholipase D family member 4) é uma exonucleossoma 5'->3' lisossomal que hidrolisa RNA e DNA de fita simples, com maior eficiência para resíduos de 5' uridina e guanosina. Ela pode produzir nucleosídeos 3'-monofosfatos e fragmentos 5'-hidroxi, desempenhando um papel fundamental na detecção de ácidos nucleicos por células do sistema imunológico. Referências relacionadas: PMID:30111894, PMID:34620855, PMID:38537643

• Através do processamento de RNA e DNA, a PLD4 fornece sinais moleculares aos receptores toll-like (TLRs). Ela coopera com RNase T2/RNASET2 para gerar 2',3'-cGMP e fragmentos de RNA ricos em citidina que ativam o TLR7, destacando sua importância na imunidade inata. Referências relacionadas: PMID:38697119

• Além da atividade exonucleasa, a PLD4 pode catalisar a transfosfatidilação entre lisofosfatidilglicerol e monoacilglicerol para produzir (S,S)-bis(monoacilglicerol)fosfatos (BMPs), que são essenciais para a formação de vesículas intralumenais lisossomais e a degradação de lipídios.

• A proteína está localizada em vários compartimentos intracelulares, incluindo o lisossoma, a membrana do retículo endoplasmático, o aparelho de Golgi, endossomas precoces, fagossomos e o núcleo, refletindo seus papéis dinâmicos no processamento imunológico.

• A PLD4 é expressa predominantemente em células dendríticas plasmacitoides e monócitos ao nível proteico, o que é consistente com sua função na detecção imunológica inata.

• A PLD4 contém um âncora de sinal, hélice transmembrana e pontes dissulfeto, sendo prevista como uma proteína transmembrana glicosilada.

• Mutações na PLD4 estão associadas ao lúpus eritematoso sistêmico, ligando suas funções de processamento de ácidos nucleicos a doenças autoimunes.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 52-200 da PLD4 humana, que inclui a região N-terminal que compreende o primeiro domínio transmembrana e parte do domínio exonucleasa; esse design pode favorecer o reconhecimento de formas de proteína nativas e parcialmente desnaturadas.
• Para WB, considere uma faixa de diluição de 1:500 a 1:2000 e valide em linhagens celulares que expressam PLD4 (por exemplo, células dendríticas humanas ou linhagens monocíticas) juntamente com lisados de tecido de rato para confirmar a reatividade cruzada.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser explorado em formatos diretos ou indiretos, com otimização do antígeno de revestimento e das condições de detecção para cada matriz de amostra.
• A ligação não específica pode ser reduzida usando tampões de bloqueio adequados; devido à localização multicompartimental, a fracionamento subcelular pode ser considerado para enriquecer o alvo.

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