Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-PLK1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P53350

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PLK1

• Serina/treonina proteína quinase que desempenha várias funções essenciais durante a fase M, incluindo a regulação da maturação do centrômero, montagem do fuso, remoção de coesinas, inativação de inibidores do APC/C e regulação da saída mitótica e citocinese. Referências relacionadas: PMID:11202906, PMID:12207013, PMID:12447691
• Fosforila uma ampla gama de substratos (por exemplo, BORA, BUB1B, CCNB1, CDC25C, FOXM1) reconhecendo motivos pré-fosforilados através de seus domínios de caixa POLO, ampliando assim os sinais regulatórios mitóticos. Referências relacionadas: PMID:11202906, PMID:12207013, PMID:12447691
• Fundamental para as funções do centrômero e montagem do fuso bipolar; fosforila KIZ, NEDD1 e NINL para promover o recrutamento do complexo de anel de gama-tubulina e a organização do centrômero. Referências relacionadas: PMID:16980960, PMID:19509060, PMID:12852856
• Regula a saída mitótica e a citocinese através da fosforilação de CEP55, ECT2, KIF20A/MKLP2, PRC1 e RACGAP1, criando locais de ancoragem no fuso central para o fator de troca de GTP Rho ECT2 e a formação do sulco de clivagem. Referências relacionadas: PMID:12939256, PMID:16247472, PMID:17351640, PMID:19468300, PMID:19468302
• Impulsiona a transição G2/M fosforilando CDC25C, WEE1, PKMYT1 e CCNB1, levando à ativação do CDK1; também aumenta a atividade transcricional do FOXM1. Referências relacionadas: PMID:11202906, PMID:12447691, PMID:12524548, PMID:19160488
• Envolvido nas funções do cinetocoro e coesão de cromátides irmãs; fosforila BUB1B, FBXO5 e STAG2 para regular a fixação do cinetocoro, o ponto de verificação de montagem do fuso e a dissociação da coesina. Referências relacionadas: PMID:15148369, PMID:15469984, PMID:17376779, PMID:17617734, PMID:18331714
• Exibe localização subcelular dinâmica: núcleo, centrômero, cinetocoro, fuso e corpo intermediário. Altamente expresso na placenta e no cólon.
• Além disso, contribui para a recuperação de danos ao DNA, quebra do envelope nuclear, resposta ao choque térmico e biogênese de cílios através da fosforilação de vários alvos (por exemplo, DCTN1, DZIP1, HSF1). Referências relacionadas: PMID:18615013, PMID:18662541, PMID:20679239, PMID:15661742, PMID:18794143, PMID:27979967, PMID:37440612, PMID:37674080

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 304–603, cobrindo os domínios de caixa POLO terminais C; esta região é altamente conservada, suportando a reatividade cruzada com o PLK1 de camundongo e rato.
• Para Western blotting, espere uma banda em aproximadamente 68 kDa; valide com controles positivos e negativos apropriados e considere o uso de linhagens celulares sincronizadas em mitose para detecção ideal.
• Em IHC-P e IF/ICC, otimize as condições de fixação/permeabilização; o PLK1 exibe localização dinâmica (centrômeros, cinetocoros, corpo intermediário) que pode exigir permeabilização suave para preservar a antigenicidade.
• Como este é um anticorpo policlonal, a titulação é essencial para cada aplicação; comece com 1:500–1:2000 para WB e ajuste com base na abundância do alvo e no método de detecção.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; o emparelhamento com um anti-PLK1 monoclonal pode aumentar a especificidade em ensaios sanduíche.
• Verifique a reatividade cruzada em seu sistema modelo; embora reativo com humano, camundongo e rato, os níveis de expressão do alvo variam entre tecidos e linhagens celulares.

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