Anti-PLOD1 Coelho pAb para WB & ELISA - Q02809

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PLOD1

• O PLOD1 codifica a lisil hidroxilase 1 (LH1), uma enzima modificadora de colágeno de ~84 kDa pertencente à família das dioxigenases dependentes de 2-oxoglutarato, essencial para a biossíntese de colágeno e a integridade do tecido conjuntivo.
• Como parte de um complexo multiproteico com P3H3 e P3H4, o PLOD1 catalisa a hidroxilação de resíduos de lisina nas cadeias alfa de colágeno em sequências -Xaa-Lys-Gly-.
  Referências relacionadas:
  PMID:10686424
  PMID:15854030
  PMID:8621606
• Os resíduos de hidroxilisina resultantes servem como locais de fixação para unidades de carboidratos e são críticos para a formação de ligações cruzadas intermoleculares estáveis de colágeno, garantindo a resistência mecânica dos tecidos.
• O PLOD1 está ancorado à membrana do retículo endoplasmático rugoso, onde hidroxila a lisina co-traducionalmente nas cadeias nascentes de procolágeno.
• A enzima requer ferro e vitamina C como cofatores e está sujeita a N-glicosilação; mutações no gene PLOD1 causam a síndrome de Ehlers-Danlos tipo VI, um distúrbio grave do tecido conjuntivo.
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, potencialmente modulando a atividade enzimática ou a localização de maneira específica para o tecido.
• A expressão do alvo é proeminente em células produtoras de colágeno, como osteoblastos, condrócitos e fibroblastos dérmicos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aminoácidos 19–295) abrange uma região altamente conservada entre o PLOD1 humano, de camundongo e de rato, consistente com a reatividade cruzada declarada; a verificação do alinhamento de sequência é recomendada para outras espécies.
• Para Western blot, espera-se uma banda próxima de 84 kDa; o PLOD1 endógeno pode ser detectável em lisados de linhagens de fibroblastos (por exemplo, MRC-5, NIH/3T3) ou tecidos ricos em colágeno (pele, osso, tendão).
• Considere otimizar a diluição do anticorpo e as condições de detecção para ELISA, usando a proteína PLOD1 recombinante ou peptídeos derivados de colágeno como antígenos de revestimento.
• O anticorpo é policlonal e pode apresentar sensibilidade e especificidade variáveis; a validação no sistema de amostra relevante é aconselhada antes de aplicações quantitativas.

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