Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-PLOD2/LH2 para WB e ELISA - O00469

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PLOD2/LH2

• O gene PLOD2 codifica a procollagênio-lisina,2-oxoglutarato 5-dioxigenase 2, também conhecida como lisil hidroxiilase 2 (LH2), uma enzima pertencente à família das dioxigenases dependentes de 2-oxoglutarato.
• A enzima catalisa a hidroxilação de resíduos de lisina nas sequências Xaa-Lis-Glic do colágeno, formando hidroximetlisina. Esses resíduos modificados são essenciais para a fixação de unidades de carboidratos e para a estabilidade das reticulações intermoleculares do colágeno.
• A PLOD2 se localiza na membrana do retículo endoplasmático rugoso e no citoplasma, onde exerce sua função enzimática durante o processamento do procollagênio.
• Existem duas isoformas principais devido ao splicing alternativo; a isoforma 2 é expressa seletivamente na pele, pulmão, dura-máter e aorta, enquanto ambas as isoformas são detectadas de forma generalizada em outros tecidos.
• A proteína é altamente expressa no pâncreas e no músculo, o que é consistente com a alta renovação de colágeno nesses tecidos.
• Como membro da família de genes PLOD, mutações no PLOD2 estão associadas à osteogênese imperfeita e outras doenças do tecido conjuntivo, destacando seu papel na biossíntese e integridade do colágeno.
• A enzima requer ferro e vitamina C como cofatores para sua atividade de dioxigenase, e sofre modificações pós-traducionais incluindo glicosilação e fosforilação.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de aproximadamente 85 kDa; considere carregar escadas de proteína adequadas e verificar a migração das bandas nos lisados das espécies relevantes do seu experimento.
• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 260–380, uma região que pode ser conservada entre humano, camundongo e rato; no entanto, a reatividade cruzada deve ser validada no sistema experimental real.
• Aplicações de ELISA podem ser exploradas usando proteína PLOD2 recombinante ou lisados celulares; recomenda-se a titulação do anticorpo e o uso de reagentes de detecção secundários adequados.
• Garanta uma preparação adequada de amostras para proteínas de membrana usando detergentes suaves para manter a conformação nativa, já que a PLOD2 está associada à membrana do retículo endoplasmático rugoso.
• A inclusão de lisados de controle positivo de pâncreas ou músculo (alta expressão endógena) pode ajudar a otimizar as condições de detecção.

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