Anticorpo policlonal de coelho anti-PLOD3 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O60568

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de PLOD3

• PLOD3 codifica a enzima multifuncional LH3, que catalisa a hidroxilação de resíduos de lisina no procolágeno, seguida de galactosilação e glicosilação, produzindo modificações maduras de glucosilgalactosil-hidroxilisina essenciais para a estabilidade do colágeno. Referências relacionadas: PMID:10934207 PMID:11896059 PMID:11956192 PMID:12475640 PMID:18298658 PMID:18834968

• É essencial para a biossíntese e a secreção normais dos colágenos do tipo IV, sendo fundamental para a integridade da membrana basal (PubMed:18834968). Referências relacionadas: PMID:18834968

• Catalisa a hidroxilação e a glicosilação da lisina no domínio semelhante ao colágeno de MBL1, implicando LH3 nas modificações do colágeno relacionadas à imunidade inata (PubMed:25419660). Referências relacionadas: PMID:25419660

• Localiza-se predominantemente no lúmen e na membrana do retículo endoplasmático rugoso, sendo também secretada no espaço extracelular.

• É expressa ubiquamente nos tecidos, com níveis mais elevados detectados no coração, na placenta e no pâncreas.

• Funciona como dioxigenase e glicosiltransferase, requer ferro e vitamina C como cofatores; mutações em PLOD3 estão associadas a distúrbios do tecido conjuntivo.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 25–280 de PLOD3 humano; considere mapear o epítopo para confirmar a especificidade, especialmente ao detectar variantes de splicing ou membros da mesma família.
• Para a análise por Western blot, valide uma banda de aproximadamente 85 kDa usando lisados celulares humanos ou de camundongo com expressão conhecida de PLOD3.
• Em IHC-P e IF/ICC, otimize as condições de recuperação antigênica e teste múltiplas diluições do anticorpo em tecidos com expressão definida de PLOD3 (por exemplo, coração e placenta).
• Anticorpos policlonais podem apresentar variabilidade entre lotes; inclua controles positivos e negativos relevantes para garantir a reprodutibilidade.
• Para ELISA, considere revestir a placa com proteína PLOD3 recombinante ou extrair a proteína total das células-alvo; a reatividade cruzada com outros parálogos de PLOD deve ser avaliada.

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