Anticorpo Monoclonal Anti-PLOD3/LH3 para WB, ELISA - O60568

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de PLOD3/LH3

• PLOD3 (também conhecido como LH3) é uma enzima multifuncional que catalisa modificações pós-traducionais de resíduos de lisina no pró-colágeno, incluindo hidroxilação, galactosilação e glicosilação, críticas para a estabilidade do colágeno e integridade da membrana basal. Referências relacionadas: PMID:11956192 PMID:12475640 PMID:18298658
• Catalisa de forma redundante a formação de hidroxilisina em motivos -Xaa-Lys-Gly- dos colágenos. Referências relacionadas: PMID:11956192 PMID:12475640 PMID:18298658
• PLOD3 também transfere galactose para resíduos de hidroxilisina, formando hidroxilisina galactosilada. Referências relacionadas: PMID:12475640 PMID:18298658 PMID:18834968
• Seu papel essencial reside na subsequente atividade de glicosiltransferase, produzindo resíduos de 1,2-glicosilgalactosil-5-hidroxilisina. Referências relacionadas: PMID:10934207 PMID:11896059 PMID:11956192
• PLOD3 é necessário para a biossíntese e secreção normais dos colágenos tipo IV e para a formação da membrana basal. Referências relacionadas: PMID:18834968
• Localiza-se principalmente no retículo endoplasmático rugoso, lúmen do RE e membrana do RE, e pode ser secretado para o espaço extracelular.
• A proteína é expressa de forma ubíqua, com níveis relativamente mais altos em coração, placenta e pâncreas, e mais baixos em pulmão, fígado e músculo esquelético. Referências relacionadas: PMID:9724729 PMID:9582318
• PLOD3 é um membro glicosilado, ligante de metais (ferro e manganês) das famílias das dioxigenases e glicosiltransferases, e mutações estão associadas a doenças.
• Também hidroxila e glicosila o domínio semelhante ao colágeno da MBL1, expandindo sua especificidade de substrato. Referências relacionadas: PMID:25419660

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 25-306 do PLOD3 humano, cobrindo uma região provavelmente acessível para ligação do anticorpo. Para Western blot, considere o uso de condições redutoras para detectar a banda de 85kDa e valide com lisados de linhagens celulares humanas e de camundongo conhecidas por expressar PLOD3 (por exemplo, coração, placenta).
• O anticorpo é validado para ELISA; para aplicações de ELISA sanduíche, o pareamento com outro clone que reconheça um epítopo distinto pode melhorar a sensibilidade. A reatividade cruzada com camundongo sugere utilidade em estudos com modelos de roedores, mas a reatividade cruzada com outras espécies deve ser verificada experimentalmente.
• Como o PLOD3 é uma proteína residente no RE e secretada, o preparo da amostra para WB pode se beneficiar de estratégias de fracionamento subcelular ou enriquecimento, particularmente para amostras com baixa expressão endógena.

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