Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-PMS2 (Validado por KO) para WB e ELISA - P54278

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PMS2

• PMS2 (Homólogo 2 da Proteína PMS1), também denominado MLH4, PMS-2, PMSL2, HNPCC4, LYNCH4 ou MMRCS4, é uma endonuclease de reparo de incompatibilidade de 96 kDa essencial para manter a estabilidade genômica.
• É um componente-chave do sistema de reparo de incompatibilidade de DNA (MMR) pós-replicativo, formando um heterodímero com MLH1 (MutL alfa). Este complexo é recrutado para os sítios de incompatibilidade por MutS alfa (MSH2-MSH6) ou MutS beta (MSH2-MSH3) após o reconhecimento de incompatibilidades base-base ou alças de inserção/deleção. Referências relacionadas: PMID:30653781, PMID:35189042
• Após o recrutamento, a atividade endonuclease do PMS2 introduz quebras de fita simples próximas à incompatibilidade, criando pontos de entrada para a exonuclease EXO1 degradar a fita contendo o erro. A metilação do DNA provavelmente direciona a clivagem para a fita recém-sintetizada, garantindo o reparo específico da fita.
• O PMS2 também possui atividade ATPase; no entanto, a hidrólise de ATP pode não ser necessária para um reparo de incompatibilidade proficiente, uma vez que mudanças conformacionais grosseiras estão ausentes.
• Além do reparo de incompatibilidade, o PMS2 está implicado na sinalização de danos no DNA, promovendo a parada do ciclo celular e a apoptose em resposta a lesões graves no DNA.
• A proteína localiza-se predominantemente no núcleo, consistente com suas funções de reparo de DNA, e sofre splicing alternativo, levando a múltiplos isoformas.
• Mutações no PMS2 estão ligadas ao câncer colorretal hereditário não poliposo (HNPCC, síndrome de Lynch) e outras síndromes de câncer por deficiência de reparo de incompatibilidade, classificando-o como um supressor de tumor.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, a proteína alvo migra aproximadamente a 96 kDa; considere usar lisados frescos de linhagens celulares colorretais humanas (ex.: HCT116, SW480) como controles positivos e valide modelos de nocaute/silenciamento para confirmar a especificidade da banda.
• Para aplicações de ELISA, recomenda-se a otimização do antígeno de revestimento e da concentração de anticorpo; teste com a proteína PMS2 humana recombinante para avaliar sensibilidade e linearidade.
• Como o anticorpo é produzido contra a proteína PMS2 humana recombinante, não se espera reatividade cruzada com outras espécies; se tentar outras espécies, realize alinhamento de sequência e validação.

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