Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-PNKD para WB, IF/ICC, ELISA - Q8N490

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PNKD

• O PNKD (discinesia paroxística não cinetogénica) é uma provável enzima tioesterase, também conhecida como regulador da miofibrilogénese 1 (MR-1) ou transativado pela proteína core do vírus da hepatite C 2. Existem duas principais isoformas: a isoforma 1 é específica do cérebro, enquanto a isoforma 2 é expressa de forma ubíqua com níveis mais elevados no músculo esquelético e miofibrilas miocárdicas.
• Pensa-se que desempenha um papel na desintoxicação celular atuando sobre substratos de α-hidroxitiosteres ainda desconhecidos. In vitro, exibe atividade hidrolase muito baixa em relação ao S-D-lactoil-glutationa, embora isto não seja considerado fisiologicamente relevante. Referências relacionadas: PMID:21487022
• A proteína localiza-se em múltiplos compartimentos subcelulares, incluindo a membrana celular, mitocôndrias, citoplasma, aparelho de Golgi e retículo endoplasmático.
• O PNKD pertence a uma família de metalo-hidrolases e contém um domínio de ligação ao zinco, consistente com a sua classificação como hidrolase (palavras-chave UniProt: Hidrolase, Ligação a metal, Zinco).
• Mutações no gene PNKD estão associadas à discinesia paroxística não cinetogénica (PNKD), um distúrbio do movimento caracterizado por distonia episódica (palavras-chave UniProt: Variante de doença, Distonia).
• A proteína também está implicada na miofibrilogénese e é um alvo transativado da proteína core do vírus da hepatite C, sugerindo papéis na biologia muscular e na patogénese viral.
• A sua massa molecular é de aproximadamente 42,9 kDa com base na previsão da sequência; o imunogénio para este anticorpo corresponde aos aminoácidos 1-270 da extremidade N-terminal da isoforma 1 do PNKD humano.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio corresponde à região N-terminal (aa 1-270) do PNKD humano, que é conservada na isoforma 1. Para a reatividade cruzada com camundongo, verifique o alinhamento da sequência entre ortólogos de PNKD humano e de camundongo.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto é de ~43 kDa (a banda observada pode diferir devido à isoforma ou modificações pós-traducionais). Use lisados de controlo positivo adequados de tecidos cerebrais ou musculares esqueléticos humanos.
• Em imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), considere a localização multicompartimental do PNKD (membrana celular, mitocôndrias, citoplasma). Recomenda-se a coloração simultânea com marcadores de organelos para confirmar a especificidade.
• Este anticorpo policlonal é adequado para ELISA e pode ser usado como reagente de captura ou deteção; no entanto, são necessários titulação e otimização para cada formato de ensaio.
• Dada a baixa abundância ou expressão específica do tecido da isoforma 1, escolha cuidadosamente os tipos de amostras (por exemplo, tecidos cerebrais para a isoforma 1, tecidos musculares para a isoforma 2).

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