Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-PNKP para WB - Q96T60

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PNKP

• A PNKP é uma enzima bifuncional que atua tanto como uma DNA 3'-fosfatase quanto como uma 5'-quinase, essencial para o reparo de quebras na fita de DNA. Referências relacionadas: PMID:10446192, PMID:10446193
• Funciona em duas vias principais de reparo de DNA: junção de extremidades não homólogas (NHEJ) e reparo por excisão de base (BER), processando terminações de DNA danificadas para ligação. Referências relacionadas: PMID:10446192, PMID:10446193, PMID:15385968
• A PNKP está localizada no núcleo e associa-se aos cromossomos, consistente com seu papel no reparo do DNA.
• A proteína é expressa em muitos tecidos, com maior expressão no baço e testículos, e menor no intestino delgado; também é encontrada em níveis mais elevados no pâncreas, coração e rins. Referências relacionadas: PMID:10446192, PMID:10446193
• A PNKP pertence à família das enzimas de reparo de DNA e também é conhecida como DNA 5'-quinase/3'-fosfatase ou polinucleotídeo quinase-3'-fosfatase.
• Contém domínios funcionais chave para ligação de ATP e atividade catalítica, e sofre modificações pós-traducionais regulatórias, incluindo acetilação e fosforilação.
• Mutações na PNKP estão associadas a distúrbios neurológicos como ataxia-apraxia oculomotora 4 (AOA4), microcefalia com convulsões (MCSZ) e doença de Charcot-Marie-Tooth tipo 2B2 (CMT2B2), destacando seu papel crítico no reparo do DNA neuronal.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno compreende os aminoácidos 60-320 da PNKP humana (NP_009185.2), cobrindo a região catalítica central; esta sequência é altamente conservada entre humanos, camundongos e ratos, consistente com a reatividade cruzada relatada.
• Para Western blot, espera-se uma banda em torno de 57 kDa. Utilize uma porcentagem de gel e um protocolo de transferência de membrana apropriados para resolver esta proteína.
• A PNKP é uma proteína nuclear; em imunofluorescência (IF/ICC) ou imuno-histoquímica (IHC-P), espere coloração nuclear. Inclua controles apropriados e etapas de recuperação de antígeno para obter os melhores resultados.
• Confirme os níveis de expressão em seu sistema de amostra, uma vez que a PNKP é expressa amplamente, mas com variações específicas de tecido (alta no baço/testículos, baixa no intestino).

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