Anticorpo Policlonado de Coelho Anti-Podoplanina para WB, IHC-P, ELISA - Q86YL7

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Podoplanina

• A Podoplanina (PDPN, também conhecida como Aggrus, GP36, T1A) é uma glicoproteína transmembranar de tipo I com domínios extracelular, transmembranar e citoplasmático. Ela sofre splicing alternativo e é intensamente sialilada.
• Através da ligação a CLEC1B, a podoplanina desencadeia a ativação e agregação plaquetária, um processo fundamental para a separação dos vasos sanguíneos e linfáticos (PubMed:14522983, PubMed:15231832, PubMed:17222411). A interação com CD9 atenua essa agregação (PubMed:18541721). Referências relacionadas: PMID:14522983 PMID:15231832 PMID:17222411 PMID:18541721
• A interação com MSN ou EZR promove a transição epitelial-mesenquimal (EMT), levando à fosforilação de ERZ e ativação de RHOA, aumentando assim a migração e a invasividade celular (PubMed:17046996, PubMed:21376833). Referências relacionadas: PMID:17046996 PMID:21376833
• A ligação da podoplanina a CD44 promove a migração celular direcional em células epiteliais e tumorais (PubMed:20962267). Ela também controla a estabilidade dos invadopódios e a degradação da matriz extracelular via via RHOC-ROCK-LIMK-CFL1 (PubMed:25486435). Referências relacionadas: PMID:20962267 PMID:25486435
• Nos linfonodos, a podoplanina regula a adesão e contratilidade das células reticulares fibroblásticas através das proteínas ERM e ativação de MYL9; o acoplamento de CLEC1B induz o relaxamento (Por similaridade).
• A podoplanina localiza-se principalmente na membrana plasmática e está enriquecida em projeções membranares: lamelipódios, filopódios, microvilosidades, dobras e invadopódios. Ela também trafega para as jangadas de membrana e apresenta polaridade apical/basolateral.
• Altamente expressa na placenta, pulmão, músculo esquelético e cérebro; upregulada em tumores colorretais e alguns carcinomas espinocelulares orais.
• Em queratinócitos, a expressão de podoplanina leva a morfologia alongada, reorganização do citoesqueleto de actina, aumento da motilidade e diminuição da adesão celular (PubMed:15515019). Referências relacionadas: PMID:15515019

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno cobre os aminoácidos 23-131, uma região dentro do domínio extracelular; esse design provavelmente visa epitopos acessíveis em condições nativas e desnaturadas, suportando as aplicações de WB e IHC-P.
• Para WB, o peso molecular previsto é de ~17 kDa; no entanto, a extensa O-glicosilação e sialilação pode fazer com que as bandas apareçam em 36–44 kDa ou mais em condições redutoras. Valide usando controles positivos apropriados, como lisados de pulmão ou placenta.
• Para IHC-P, considere a recuperação de antígeno e valide a coloração em tecidos conhecidos por serem positivos (por exemplo, placenta, pulmão, secções tumorais) com controles negativos apropriados.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato foi indicada; no entanto, verifique a homologia de sequência e os tamanhos de banda esperados entre as espécies antes de usar em experimentos multiespécie.
• Para ELISA, o imunógeno recombinante pode servir como padrão de captura; teste as condições de revestimento e garanta a compatibilidade do anticorpo de detecção.

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