Anticorpo Policlonais Anti-POLR2B para WB, IHC-P, ELISA - P30876

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do POLR2B

• POLR2B (subunidade B da RNA polimerase II, RPB2) é a segunda maior subunidade da RNA polimerase II (Pol II), a enzima que sintetiza precursores de mRNA e diversos RNAs não codificantes de maneira dependente de DNA. Referências relacionadas: PMID:27193682 PMID:30190596 PMID:9852112
• Junto com a maior subunidade POLR2A/RPB1, POLR2B forma o centro catalítico, coordenando dois íons Mg²⁺ e fornecendo resíduos de lisina que facilitam o emparelhamento de bases de Watson–Crick durante a adição de nucleotídeos. Referências relacionadas: PMID:30190596 PMID:9852112
• POLR2B possui atividade intrínseca de proofreading por exonuclease 3′→5′ que corrige ribonucleotídeos incorretamente incorporados, retrocedendo o RNA nascente e clivando a ligação fosfodiester. Referências relacionadas: PMID:8381534
• Além da transcrição dependente de DNA, POLR2B catalisa a polimerização de RNA direcionada por RNA, estendendo a extremidade 3′ de certos RNAs não codificantes usando um molde interno, o que pode reduzir a estabilidade de ncRNAs repressivos.
• A proteína se localiza exclusivamente no núcleo, o que é consistente com seu papel transcripcional.
• POLR2B está sujeito a fosforilação e metilação regulatórias e contém motivos de dedo de zinco que provavelmente contribuem para sua integridade estrutural e interações com ácidos nucleicos.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos 260 aminoácidos N-terminais do POLR2B humano. Esta região é adequada para detectar a proteína completa de ~134 kDa em western blot; confirme a especificidade usando controles de knockdown ou knockout.
• Para imunohistoquímica (IHC-P), considere otimizar a recuperação de antígeno e a diluição do anticorpo primário, pois tecidos fixados em formalina e embebidos em parafina podem exigir condições diferentes.
• Este anticorpo reconhece POLR2B de humano, camundongo e rato; valide no sistema de amostra relevante ao trabalhar com espécies diferentes.
• Em ELISA, use o anticorpo como reagente de captura ou detecção de acordo com o formato do ensaio; confira os resultados com um padrão conhecido.

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