Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-POLR2D para WB, IHC-P, ELISA - O15514

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da POLR2D

• POLR2D (subunidade RPB4 da RNA polimerase II dirigida por DNA, também conhecida como RBP4, RPB16) é uma subunidade central da RNA polimerase II (Pol II) humana, a enzima central responsável pela síntese de precursores de mRNA e muitos RNAs não codificantes.
• Como parte de um subcomplexo conservado com POLR2G/RPB7, a POLR2D liga-se a uma cavidade formada pelas subunidades RPB1, RPB2 e RPABC2 perto da base do elemento clamp da Pol II, ajudando a travar o clamp numa conformação fechada e impedindo que o DNA de cadeia dupla entre prematuramente na fenda do sítio ativo.
• O subcomplexo POLR2D/POLR2G também interage com DNA e RNA de cadeia simples, sugerindo papéis no manuseio de ácidos nucleicos durante a iniciação ou alongamento da transcrição.
• A POLR2D está localizada exclusivamente no núcleo, consistente com o seu papel na maquinaria de transcrição.
• A proteína é objeto de estudos estruturais (palavra-chave: estrutura 3D) e foi identificada por proteómica baseada em espectrometria de massa, apoiando a sua incorporação estável na Pol II.
• Não foram relatados isoformas específicas de tecido ou modificações pós-traducionais para a POLR2D, implicando um papel relativamente uniforme entre os tipos celulares.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio consiste numa proteína recombinante que abrange os aminoácidos 1–142 do POLR2D humano. Esta região N-terminal é bem conservada, o que pode explicar a reatividade cruzada do anticorpo com rato e rato (Mus).
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto da POLR2D é de aproximadamente 16 kDa; utilize um gel de alta percentagem ou um gel gradiente para garantir uma separação clara das bandas de baixo peso molecular e inclua controlos de carga apropriados.
• Em IHC-P, espera-se uma coloração nuclear forte; considere protocolos de recuperação de antigénio e valide a especificidade utilizando péptidos de bloqueio ou tecidos de controlo knockdown/knockout sempre que possível.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado em ensaios diretos ou sanduíche; no entanto, os utilizadores finais devem otimizar as condições de revestimento e as concentrações de anticorpo com base na sua configuração experimental específica.

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