Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-POLR3K para WB, ELISA - Q9Y2Y1

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Antecedentes Biológicos: Função e Localização do POLR3K

• A subunidade RPC10 da RNA polimerase III dirigida por DNA (também conhecida como POLR3K, RPC10, RPC11, RPC12.5) é um componente central da RNA polimerase III (Pol III) (PubMed:20413673, PubMed:30584594, PubMed:33335104).
  Referências relacionadas: PMID:20413673, PMID:30584594, PMID:33335104

• A Pol III sintetiza pequenos RNAs não codificantes e desempenha um papel crucial na fidelidade da transcrição, mediando a correção de provas e a clivagem de nucleótidos incorporados incorretamente (PubMed:33335104, PubMed:33558764, PubMed:33558766).
  Referências relacionadas: PMID:33335104, PMID:33558764, PMID:33558766

• Ao atingir o sinal de terminação poli(dT), o POLR3K induz a abertura da pinça da Pol III e a terminação da transcrição (PubMed:33335104, PubMed:33558764, PubMed:33558766).
  Referências relacionadas: PMID:33335104, PMID:33558764, PMID:33558766

• O POLR3K funciona como um sensor de DNA nuclear e citosólico envolvido na resposta imune inata; deteta dsDNA não próprio de bactérias intracelulares e vírus de DNA, levando à transcrição para dsRNA que desencadeia as vias do interferão tipo I e NF-kappa-B via RIG-I (PubMed:19609254, PubMed:19631370).
  Referências relacionadas: PMID:19609254, PMID:19631370

• A localização subcelular é predominantemente nuclear.

• Contém motivos de dedo de zinco e é uma proteína de ligação a metais, essencial para a sua atividade catalítica.

• Mutações no POLR3K estão associadas a leucodistrofia e neurodegeneração, sublinhando a sua importância na saúde neurológica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é uma proteína de fusão recombinante que cobre os aminoácidos 1-108 do POLR3K humano (NP_057394.3), que abrange a proteína de comprimento total. Este design deve produzir anticorpos que reconheçam as formas nativas e desnaturadas, suportando aplicações de WB e ELISA.
• Para Western blot, considere o uso de lisados de células humanas (por exemplo, HeLa, HEK293) como controlos positivos. O peso molecular previsto é de 12 kDa, mas os níveis de expressão endógena podem variar; recomenda-se a otimização da diluição do anticorpo primário e das condições de incubação.
• Ao realizar ELISA, valide o anticorpo com o imunogénio ou peptídeo para estabelecer uma curva padrão. A reatividade cruzada com outras espécies não foi testada, pelo que deve confirmar a especificidade no seu sistema modelo.
• Como um anticorpo policlonal, pode ocorrer variabilidade de lote para lote; recomendamos a inclusão de controlos internos e a realização de validação específica do lote para experiências críticas.

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