Anti-PORCN Anticorpo Policlonal de Coelho para WB e ELISA - Q9H237

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PORCN

• O PORCN, também conhecido como proteína-serina O-palmitoleoiltransferase porcupine ou proteína MG61, é codificado pelo gene PORCN (também designado MG61, PORC, PPN) em humanos.
• O PORCN atua como um regulador chave da via canônica de sinalização Wnt, catalisando a ligação de palmitoleato (um ácido graxo monoinsaturado de 16 carbonos) às proteínas Wnt, o que é essencial para sua secreção e ligação ao receptor.
• Como uma aciltransferase, o PORCN pertence à família de O-aciltransferases de membrana e contém múltiplas hélices transmembrana, ancorando-o às membranas das organelas.
• O PORCN localiza-se especificamente na membrana do retículo endoplasmático, onde modifica os ligantes de Wnt antes de seu tráfego e liberação.
• Existem múltiplas isoformas do PORCN devido ao splicing alternativo, sendo a isoforma 1 proeminentemente expressa em regiões do cérebro fetal e adulto, coração, músculo esquelético e testículos, enquanto a isoforma 4 é detectada em um conjunto diferente de tecidos, incluindo rim, fígado, pulmão e baço.
• Mutações no PORCN estão associadas à hipoplasia dérmica focal (síndrome de Goltz), destacando seu papel crítico no desenvolvimento e ligando-a à palavra-chave da variante da doença.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Dado que o imunógeno corresponde aos aminoácidos 220-320 do PORCN humano, este anticorpo pode reconhecer uma sequência dentro da região C-terminal da proteína; para western blotting, considere o uso de condições redutoras e um lisado de controle positivo de tecidos com alta expressão de PORCN, como testículos ou cérebro.
• Para aplicações de ELISA, recomendamos otimizar a concentração do antígeno de revestimento e a diluição do anticorpo em uma titulação em xadrez, e validar a especificidade usando a proteína recombinante PORCN ou bloqueio com peptídeo.
• Já que o PORCN é uma proteína transmembrana de baixa abundância, o enriquecimento de frações de membrana ou imunoprecipitação antes do WB pode melhorar a sensibilidade de detecção.
• A reatividade cruzada com o PORCN de camundongo e rato foi indicada; no entanto, aconselhamos confirmar a reatividade em seu sistema experimental específico devido à variabilidade potencial do epítopo.

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