Anticorpo Policlonal Anti-PPAT para WB, IF/ICC, ELISA - Q06203

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PPAT

• A PPAT, também conhecida como glutamina fosforribosilpirofosfato amidotransferase (GPAT), é a enzima responsável por catalisar a primeira etapa comprometida da biossíntese de purinas de novo.
• Ela converte fosforribosilpirofosfato (PRPP) e glutamina em fosforribosilamina, um precursor crítico para a síntese de nucleotídeos de purina.
• A enzima contém um cluster ferro-enxofre 4Fe-4S e requer magnésio como cofator para a atividade catalítica.
• A PPAT está sujeita a regulação alostérica e acetilação pós-traducional, que modulam sua atividade em resposta às demandas celulares de nucleotídeos.
• Seu padrão de expressão onipresente reflete o papel essencial ("housekeeping") da biossíntese de purinas em todos os tecidos.
• Com um peso molecular de aproximadamente 57 kDa (57,4 kDa previsto a partir da sequência), a PPAT é um alvo comum em estudos proteômicos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Para Western blotting, uma faixa de diluição inicial recomendada é de 1:500 a 1:2000; a otimização é essencial para obter sinais específicos e claros.
• Lisados de controle positivo podem ser preparados a partir de linhagens celulares amplamente disponíveis (por exemplo, HeLa, HEK293) ou tecidos de camundongo/rato, dada a expressão onipresente da PPAT.
• Em imunofluorescência/ICC, protocolos adequados de fixação e permeabilização devem ser testados para garantir a acessibilidade do anticorpo ao alvo.
• Ao usar para ELISA, considere o pareamento com um anticorpo de detecção correspondente e valide na matriz de amostra relevante.
• A reatividade cruzada com PPAT de camundongo e rato foi observada; no entanto, recomenda-se a validação individual no sistema experimental específico.

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