Anticorpo Policloal de Coelho Anti-PPM1A para WB, IF/ICC, ELISA - P35813

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PPM1A

• PPM1A (Proteína fosfatase 1A), também conhecida como PP2Cα ou PP2CA, é uma serina/treonina fosfatase codificada pelo gene PPM1A em humanos. Pertence à família PP2C de fosfatasas de proteínas dependentes de metal.
• Ela funciona como uma enzima de ampla especificidade que regula negativamente a sinalização de TGF-beta desfosforilando SMAD2 e SMAD3, levando à sua dissociação de SMAD4 e exportação nuclear, terminando assim o sinal.
• PPM1A desempenha um papel crítico na modulação da ativação de NF-kappa-B mediada por TNF, desfosforilando e inativando a quinase IKBKB/IKKβ.
• Ela também desfosforila as subunidades PRKAA1 e PRKAA2 da AMPK, o que a implica nas vias de homeostase energética.
• Subcelularmente, PPM1A é encontrada no núcleo, citoplasma, citosol e compartimentos associados à membrana, o que é consistente com seus diversos papéis na sinalização celular.
• A proteína sofre splicing alternativo, é miristoilada e é fosforilada. Ela requer íons magnésio ou manganês como cofatores para atividade catalítica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde à região C-terminal (aa 161-370) da PPM1A humana, o que pode conferir especificidade para a isoforma canônica da PP2Cα; verifique o desempenho no sistema de amostra relevante.
• Para Western blot (WB), o peso molecular previsto é de aproximadamente 42 kDa; considere carregar controles positivos adequados (por exemplo, lisados de HeLa ou HEK293) e otimizar as condições de bloqueio.
• Para imunofluorescência/ICC, os métodos de permeabilização e fixação podem influenciar a detecção das frações nuclear e citoplasmática; valide marcadores de co-localização.
• Quando usado em ELISA, o anticorpo pode ser adequado como reagente de captura e detecção; realize titulação cruzada para determinar as concentrações de trabalho ideais.
• Como a reatividade cruzada está confirmada para humano, camundongo e rato, o sinal específico da espécie deve ser validado com extratos de tecidos endógenos ou linhagens celulares.

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