Anti-PPP1R15A Anticorpo Policlonal de Coelho (GADD34) para WB, IF/ICC, ELISA - O75807

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PPP1R15A

• Identidade da proteína: Também conhecida como GADD34, proteína indutível por parada de crescimento e dano no DNA, e homóloga de MyD116. Codificada pelo gene PPP1R15A (GeneID: 23645, SWISS: O75807). Peso molecular UniProt ~73,5 kDa; observado ~73 kDa.
• Função principal: Recruta a proteína fosfatase 1 (PP1) para desfosforilar o fator de iniciação da tradução eIF-2A, revertendo o desligamento da síntese proteica induzida por estresse e facilitando a recuperação celular do estresse. Referências relacionadas: PMID:26095357 PMID:26742780
• Modulação da via TGF-β: Regula negativamente a sinalização TGF-beta, promovendo a desfosforilação mediada por PP1 da TGFB1. Referências relacionadas: PMID:14718519
• Apoptose: Pode promover a apoptose induzindo a fosforilação de p53 em Ser-15. Referências relacionadas: PMID:14635196
• Autofagia: Essencial para a autofagia sustentada, ajustando a tradução durante a inanição, permitindo assim a biogênese lisossomal e o fluxo autofágico. Referências relacionadas: PMID:32978159
• Fator de restrição viral: Atenua a replicação do HIV-1 inibindo a tradução mediada pelo RNA TAR. Referências relacionadas: PMID:31778897
• Infecção microbiana: Promove a replicação do enterovírus 71 mediando a atividade do local de entrada interno do ribossomo (IRES) do 5'-UTR viral.
• Localização subcelular: Associa-se à membrana do retículo endoplasmático e à membrana externa da mitocôndria.
• Modificações pós-traducionais: Sujeita a fosforilação e conjugação tipo ubiquitina (ubiquitinação).
• O splicing alternativo gera múltiplas isoformas de transcritos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 375-674 do PPP1R15A humano, cobrindo uma região terminal C. O anticorpo policlonal resultante pode reconhecer múltiplas isoformas ou formas modificadas.
• Para Western blot (WB), espera-se uma banda em torno de 73 kDa; bandas adicionais podem aparecer devido a modificações pós-traducionais ou splicing alternativo. O pré-tratamento das amostras com inibidores de fosfatases pode ajudar a preservar sinais dependentes de fosforilação.
• Em IF/ICC, considere que o GADD34 está localizado no RE e nas mitocôndrias; a coloração simultânea com marcadores de organelas pode auxiliar na verificação. A permeabilização com detergentes (por exemplo, 0,1% Triton X-100) é geralmente necessária.
• O anticorpo apresenta reatividade cruzada com amostras humanas, de camundongo e de rato. Valide no seu sistema de modelo específico e inclua controles positivos e negativos apropriados (por exemplo, células induzidas por estresse vs. não tratadas).
• Aplicações de ELISA podem exigir otimização do antígeno de revestimento e das condições de detecção; o imunógeno recombinante pode servir como controle positivo.

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