Anticorpo Policlonico de Coelho Anti-PPP4C para WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P60510

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PPP4C

• PPP4C codifica a subunidade catalítica da serina/treonina proteína fosfatase 4 (PP4), também conhecida como proteína fosfatase X (PP-X).
• PP4 é uma fosfatase ubíqua envolvida em diversos processos celulares, incluindo organização de microtúbulos em centrossomos, maturação de snRNP spliceossomal, apoptose, reparo de DNA, sinalização de TNF-alfa, ativação de JNK, regulação da acetilação de histonas, sinalização de checkpoint de danos no DNA, ativação de NF-kappa-B e migração celular.
• PP4 forma complexos distintos com subunidades reguladoras como PPP4R1, PPP4R2 e PPP4R3A, que conferem especificidade ao substrato: por exemplo, o complexo PPP4C-PPP4R2-PPP4R3A desfosforila o gama-H2AX nos sítios de dano no DNA, enquanto o complexo PPP4C-PPP4R1 pode regular a HDAC3.
• A proteína se localiza predominantemente no citoplasma e núcleo, com enriquecimento no centrossomo e centro de organização de microtúbulos, o que é consistente com seus papéis na regulação do citoesqueleto e mitose.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação e metilação, e a enzima requer manganês como cofator para sua atividade hidrolítica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína de fusão recombinante que cobre os aminoácidos 1-307 da PPP4C humana (NP_002711.1), que representa a subunidade catalítica de comprimento total; espera-se que esse design gere anticorpos policlonais que reconhecem múltiplos epítopos.
• Para análise por Western blot, é esperada uma banda principal próxima a 35 kDa; no entanto, modificações pós-traducionais ou formação de complexos podem resultar em bandas adicionais — valide no sistema de amostras relevante.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P) e imunofluorescência (IF/ICC), leve em consideração que a PPP4C se localiza tanto no citoplasma quanto no núcleo, com enriquecimento centrossomal; protocolos adequados de fixação e permeabilização devem ser testados.
• Para aplicações de imunoprecipitação (IP) e ELISA, condições padrão podem ser utilizadas; observe que, como uma preparação policlonal, a ligação cruzada a esferas ou o uso de um anticorpo de ligação pode melhorar a eficiência de captura.
• A reatividade cruzada com ortólogos de camundongo e rato é confirmada, mas o alinhamento de sequências e a confirmação preliminar na espécie alvo são recomendados antes de ensaios de alto rendimento.

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