Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Prdm9 para IHC-P, ELISA, CUT&Tag - Q96EQ9

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de PRDM9

• PRDM9 (também conhecido como Meisetz, Hst1 ou proteína de esterilidade híbrida 1) é uma histona metiltransferase que mono-, di- e tri-metila sequencialmente tanto H3K4 quanto H3K36 para gerar H3K4me3 e H3K36me3, desempenhando um papel fundamental na determinação de pontos quentes meióticos e na recombinação. Referências relacionadas: PMID:16292313 PMID:24095733 PMID:24785241
• Além de H3, PRDM9 pode mono- e di-metilar a histona H4 na Lys20 (H4K20me1/me2) e tri-metilar H3K9, sendo H3K9me2 o substrato preferencial. Referências relacionadas: PMID:24785241 PMID:27362481
• Durante a prófase meiótica, PRDM9 liga-se a motivos específicos de DNA através do seu arranjo de dedos de zinco C-terminal, direcionando o enriquecimento local de H3K4me3 e H3K36me3 em nucleossomos adjacentes. Referências relacionadas: PMID:22028627 PMID:27362481 PMID:29478809
• Essa paisagem de modificação de histonas promove a formação de quebras duplas programadas de DNA (DSBs) nos pontos quentes ligados a PRDM9, iniciando a recombinação meiótica. Referências relacionadas: PMID:16292313 PMID:29478809
• PRDM9 interage com múltiplos complexos proteicos durante a meiose: ele se associa a CDYL e EHMT2 no leptóteno inicial e, posteriormente, recruta EWSR1 e CXXC1, que conectam os pontos quentes ao eixo do cromossomo através de REC8. Referências relacionadas: PMID:27932493 PMID:25894966
• Além do seu papel na recombinação, PRDM9 atua como ativador transcricional na prófase meiótica inicial, utilizando H3K4me3 e H3K36me3 como marcas epigenéticas para a ativação gênica. Referências relacionadas: PMID:16292313
• PRDM9 sofre autometilação, e sua atividade metiltransferase pode ser atenuada por acetilação ou fosforilação da histona H3. Referências relacionadas: PMID:28126738 PMID:27362481
• PRDM9 é expressa especificamente em células germinativas que entram na prófase meiótica nas gônadas fetais femininas e no testículo pós-natal, e se localiza no núcleo e nos cromossomos. Referências relacionadas: PMID:16292313 PMID:27932493

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi gerado contra uma proteína de fusão recombinante que abrange os aminoácidos 87–370 da PRDM9 de camundongo, uma região que inclui o domínio PR/SET e exclui o arranjo de dedos de zinco altamente repetitivo, o que pode aumentar a especificidade pelo alvo.
• Seu uso foi relatado para aplicações em IHC-P, ELISA e CUT&Tag; considere otimizar a titulação do anticorpo e as condições do ensaio para o seu sistema modelo específico.
• Dada a reatividade cruzada observada com a PRDM9 humana, este anticorpo pode ser utilizado na análise de amostras humanas; no entanto, recomenda-se a validação independente no tecido ou tipo celular relevante.
• O peso molecular previsto de PRDM9 é de aproximadamente 97 kDa; para aplicações de Western blotting ainda não listadas, teste um painel de controles positivos, como lisados de células germinativas meióticas.
• Para IHC-P, os métodos de recuperação de antígeno e os sistemas de detecção devem ser padronizados usando secções de tecido com expressão conhecida de PRDM9, como testículo ou ovário fetal.

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