Anticorpo policlonal de coelho anti-PRG4 para WB e ELISA - Q92954

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do PRG4

• O proteoglicano 4 (PRG4), também conhecido como lubricina, fator estimulador de megacariócitos (MSF) e proteoglicano da zona superficial (SZP), é codificado pelo gene PRG4. É uma glicoproteína secretada que sofre splicing alternativo, originando múltiplas isoformas com distribuições teciduais e funções distintas.
• O PRG4 desempenha um papel crítico na lubrificação de limite das articulações móveis, impedindo a deposição de proteínas da sinóvia sobre a cartilagem e inibindo a adesão de células sinoviais à superfície da cartilagem, mantendo assim a homeostase articular.
• A isoforma F do PRG4 atua como fator de crescimento, estimulando a proliferação de linhagens celulares hematopoiéticas e endoteliais primitivas, o que indica um papel na biologia dos megacariócitos e do endotélio.
• Subcelularmente, o PRG4 é secretado no espaço extracelular, de acordo com suas funções no líquido sinovial e como sinal matricelular.
• A expressão tecidual é mais elevada no tecido sinovial, na cartilagem e no fígado, com níveis mais baixos no coração e nos pulmões. A isoforma B é expressa nos rins, pulmões, fígado, coração e cérebro, enquanto as isoformas C e D são amplamente expressas.
• A proteína é caracterizada por ligações dissulfeto, glicosilação e modificações de proteoglicano, além de conter regiões repetitivas que podem contribuir para suas propriedades lubrificantes.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde a uma região da porção C-terminal do PRG4 humano (aminoácidos 1264-1363 da isoforma NP_001121180.2). Essa região pode estar presente em várias isoformas; verifique a especificidade da isoforma, se necessário.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de aproximadamente 151 kDa; no entanto, devido à glicosilação extensa, a banda observada pode migrar em um peso molecular mais alto. Otimize a porcentagem do gel e as condições de transferência de acordo.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser utilizado como reagente de captura ou detecção; recomenda-se combiná-lo com outro anticorpo contra PRG4 para ensaios do tipo sanduíche.
• Este anticorpo apresenta reatividade cruzada com rato; considere validá-lo em líquido sinovial ou extratos de cartilagem de rato ao utilizar modelos de rato.

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