Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-PRKAR2B para WB, IHC-P, ELISA - P31323

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PRKAR2B

• O PRKAR2B codifica a subunidade reguladora tipo II-beta da proteína quinase dependente de AMPc (PKA), uma enzima chave nas vias de sinalização por AMPc.
• Essa subunidade reguladora se liga ao AMPc e, após a ligação, libera as subunidades catalíticas, levando à ativação da PKA e à fosforilação dos alvos downstream.
• As cadeias reguladoras do tipo II mediam a associação à membrana ao se ligar a proteínas de ancoragem, incluindo a quinase MAP2, localizando assim a atividade da PKA em compartimentos subcelulares específicos.
• A proteína está predominantemente localizada no citoplasma e também se associa à membrana celular.
• A expressão tecidual do PRKAR2B é variável; ele representa um dos quatro tipos de subunidades reguladoras (I-alfa, I-beta, II-alfa, II-beta) que exibem padrões de expressão específicos por tecido.
• O PRKAR2B contém dois domínios de ligação ao AMPc e é regulado por fosforilação (identificado como fosfoproteína em estudos de proteômica).
• Palavras-chave do UniProt: AMPc, ligação ao AMPc, membrana celular, citoplasma, membrana, ligação a nucleotídeos, fosfoproteína, identificação por proteômica, proteoma de referência, repetição.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 319–418, o que corresponde a uma região próxima ao C-terminal do PRKAR2B. Considere verificar a especificidade do anticorpo usando ensaios de competição com peptídeos ou testando em lisados de células com knockout/knockdown de PRKAR2B.
• Para Western blotting, uma banda esperada de aproximadamente 46 kDa (consistente com o peso molecular calculado de 46.302 Da) deve ser detectada. Inclua controles de carregamento apropriados e confirme a identidade da banda com amostras biológicas relevantes.
• Na imuno-histoquímica (embloco de parafina, IHC-P), as condições de recuperação de antígeno podem precisar de otimização; teste protocolos baseados em citrato ou EDTA em tecidos controle positivos conhecidos.
• Para aplicações em ELISA, o imunógeno baseado em peptídeo sugere que o anticorpo pode reconhecer epítopos lineares; um formato de ELISA direto ou sanduíche pode ser avaliado.
• A reatividade cruzada com PRKAR2B de camundongo e rato foi relatada; valide no sistema de amostra relevante para garantir uma detecção consistente entre as espécies.

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