Anti-PRKCQ (nPKC-theta) Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, ELISA - Q04759

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PRKCQ

• PRKCQ (nPKC-theta) é uma serina/treonina proteína quinase dependente de fosfolipídios e diacilglicerol (DAG), independente de cálcio, que desempenha um papel não redundante na sinalização do receptor de células T (TCR), incluindo ativação, proliferação, diferenciação e sobrevivência de células T.
• Em células T coestimuladas por TCR/CD28, o PRKCQ é necessário para a ativação de NF-kappa-B e JUN, que impulsionam a produção de IL2, e participa da transativação dependente de cálcio de NFATC1 e NFATC2. Referências relacionadas: PMID:21964608
• Ele medeia a ativação da via canônica de NF-kappa-B ao fosforilar diretamente o CARD11, levando ao recrutamento do complexo BCL10-MALT1 e ativação do IKK, e influencia indiretamente a via não canônica de NF-kappa-B.
• Durante a diferenciação de células T, o PRKCQ é crucial para o desenvolvimento de células T auxiliares 2 (Th2) e células Th17 pró-inflamatórias, com um papel menor nas respostas Th1.
• Nas plaquetas, o PRKCQ regula a transdução de sinal a jusante da integrina ITGA2B e dos receptores de trombina, promovendo a sinalização "de fora para dentro" e a secreção de grânulos.
• O PRKCQ fosforila uma variedade de substratos: fosforila CBLB para promover sua degradação, BAD para mediar sinais pró-supervivência, e IRS1 para modular a sinalização da insulina, entre outros.
• Fosforila CCDC88A/GIV, inibindo sua atividade de fator de troca de nucleotídeos guanina, o que afeta a migração celular e a sinalização. Referências relacionadas: PMID:23509302
• Fosforila e ativa LRRK1, que por sua vez fosforila proteínas RAB envolvidas no tráfego intracelular. Referências relacionadas: PMID:36040231
• A proteína se localiza no citoplasma e na membrana celular, consistente com seu papel na transdução de sinal.
• O PRKCQ é expresso no músculo esquelético, células T, células megacarioblásticas e plaquetas, e contém domínios de quinase característicos, motivos de dedo de zinco e sítios regulatórios de fosforilação/ubiquitinação.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína de fusão recombinante que cobre a região terminal N (aminoácidos 1-230) do PRKCQ humano. Este projeto pode detectar a proteína de comprimento total e isoformas potenciais; valide com controles apropriados no seu sistema de amostras.
• Para Western blot, o peso molecular previsto é de 82 kDa. Use controles de carregamento apropriados e otimize a diluição do anticorpo para seus lisados específicos.
• A reatividade cruzada com humano, camundongo e rato possibilita estudos multiespécies. Realize experimentos iniciais de titulação em cada espécie para determinar as concentrações de trabalho ideais.
• Em aplicações de ELISA, métodos de detecção direta ou indireta podem ser usados. Certifique-se de que o revestimento de antígeno e o emparelhamento de anticorpos estejam otimizados para o formato do seu ensaio e requisitos de sensibilidade.
• O envio é feito em sacos de gelo; ao receber, armazene conforme recomendado e minimize os ciclos de congelamento-descongelamento para manter a integridade do anticorpo.

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