Anticorpo policlonal de coelho anti-PRKRIP1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q9H875

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de PRKRIP1

• Identidade e aliases da proteína: PRKRIP1 (proteína 1 de interação com PRKR), também denominada C114 e KRBOX3, é uma proteína nuclear de 21 kDa codificada pelo gene PRKRIP1 (GeneID: 79706) em humanos, com ortólogos conservados entre as espécies.
• Função central no splicing: PRKRIP1 é necessário para o splicing do pré-mRNA como componente integral do spliceossomo, a maquinaria macromolecular responsável pela remoção de íntrons e ligação de éxons. Referências relacionadas: PMID:28502770 PMID:30705154
• Ligação ao RNA: Liga-se ao RNA de fita dupla, uma característica que pode associá-lo ao reconhecimento de substratos ou a interações regulatórias durante o splicing.
• Inibição de quinase: PRKRIP1 inibe a atividade quinase de EIF2AK2 (PKR), uma proteína envolvida nas respostas antivirais e na sinalização de estresse, embora essa inibição tenha sido inferida a partir da similaridade de sequência.
• Localização subcelular: A proteína localiza-se predominantemente no núcleo, com enriquecimento observado no nucléolo, de acordo com suas funções no processamento de RNA.
• Splicing alternativo e diversidade estrutural: PRKRIP1 sofre splicing alternativo, gerando múltiplas isoformas; sua sequência inclui domínios de hélice enrolada previstos, que podem mediar interações proteína-proteína.
• Classificação no spliceossomo: As palavras-chave do UniProt classificam PRKRIP1 como relacionado ao spliceossomo, ao processamento de mRNA e ao splicing de mRNA, destacando sua participação essencial na regulação do splicing constitutivo e possivelmente alternativo.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 67–134 de PRKRIP1 humano, uma região que pode ser conservada entre as espécies; considere verificar a identidade da sequência em camundongo e rato para antecipar a reatividade cruzada.
• Para Western blot (WB), espera-se uma banda em torno de 21 kDa; pode ser necessário otimizar o bloqueio e a diluição do anticorpo para cada tipo de amostra.
• Na imunofluorescência/imuno-histoquímica (IF/ICC), as condições de permeabilização devem ser validadas, e os padrões de marcação nuclear, incluindo o enriquecimento nucleolar, podem servir como controle positivo de localização.
• Ao utilizar ELISA, inclua controles apropriados e considere estratégias de revestimento com antígeno para garantir uma detecção precisa.
• Devido à natureza policlonal deste anticorpo, a consistência entre lotes em aplicações como WB e IF deve ser confirmada em experimentos preliminares.

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