Anticorpo Monoclonal Anti-PRMT5 para WB, IHC-P, ELISA - O14744

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PRMT5

• O PRMT5 é uma arginina metiltransferase do tipo II que catalisa a dimetilação simétrica de resíduos de arginina, com preferência por formar monometilarginina (MMA) em vez de dimetilarginina simétrica (sDMA) (PubMed:10531356, PubMed:11152681, PubMed:11747828). Referências relacionadas: PMID:10531356, PMID:11152681, PMID:11747828
• Metila especificamente as proteínas Sm D1 (SNRPD1) e D3 (SNRPD3), uma modificação crítica para a montagem e biogénese das partículas centrais de snRNP e, consequentemente, para o splicing de pré-mRNA (PubMed:11747828, PubMed:12411503, PubMed:17709427). Referências relacionadas: PMID:11747828, PMID:12411503, PMID:17709427
• O PRMT5 atua como um corepressor transcricional ao metilar a histona H4 na Arg-3 (H4R3) e a histona H3 na Arg-8; liga-se e reprime os promotores dos genes da globina gama HBG1/HBG2 em conjunto com o LYAR (PubMed:25092918). Referências relacionadas: PMID:25092918
• Localiza-se no citoplasma, núcleo, cromossoma e aparelho de Golgi, indicando o seu envolvimento em processos nucleares (regulação transcricional, splicing de RNA) e citoplasmáticos (transdução de sinais).
• Substratos não histónicos chave incluem EGFR, RAF1, p53/TP53, POLR2A e proteínas Piwi, através das quais o PRMT5 modula a sinalização de EGF, respostas a danos no DNA e a terminação da transcrição pela RNA polimerase II (PubMed:21258366, PubMed:21917714, PubMed:19011621, PubMed:26700805). Referências relacionadas: PMID:21258366, PMID:21917714, PMID:19011621, PMID:26700805

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é um péptido sintético que corresponde aos aminoácidos 1-100 do PRMT5 humano. Espera-se que o anticorpo reconheça a região N-terminal; verifique o epítopo se for necessário um mapeamento preciso.
• Para Western blotting, prevê-se uma banda de aproximadamente 73 kDa; considere o uso de lisados de células inteiras de linhas celulares conhecidas por expressarem PRMT5 (por exemplo, HeLa, HEK293) como controlos positivos.
• Para imuno-histoquímica (secções embebidas em parafina), podem ser necessários protocolos padrão de recuperação de antigénio (por exemplo, tampão citrato, pH 6,0); valide a coloração num painel de tecidos relevante.
• Devido à alta conservação da sequência entre humano, camundongo e rato, espera-se que o anticorpo apresente reatividade cruzada; no entanto, valide sempre na espécie e no sistema experimental de interesse.

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