Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Receptor de Progesterona para WB, IHC-P, ELISA - P06401

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Receptor de Progesterona

• O receptor de progesterona (PR), codificado pelo gene PGR/NR3C3, pertence à superfamília dos receptores nucleares e é um fator de transcrição ativado por ligante que regula a expressão de genes alvo em resposta à progesterona.
• O PR existe como duas principais isoformas, PR-A e PR-B, produzidas pelo uso alternativo de promotores e splicing alternativo. O PR-B contém um domínio de função de ativação N-terminal adicional (AF3) ausente no PR-A, permitindo resultados transcricionais específicos da isoforma.
• Dependendo da isoforma, o PR funciona como um ativador ou repressor transcricional. O PR-B é geralmente um ativador mais forte de promotores responsivos à progesterona, enquanto o PR-A pode atuar como um repressor transdominante de outros receptores de hormônios esteroides, incluindo PR-B, receptor mineralocorticoide (MR) e receptor de estrogênio (ER).
• Após a estimulação hormonal, o PR está envolvido na ativação da sinalização MAPK dependente de SRC, ligando a ação da progesterona a cascatas de sinalização não genômicas rápidas.
• O PR tem sido implicado na função mitocondrial; o PR ligado à progesterona aumenta o potencial da membrana mitocondrial e a respiração celular, sugerindo um papel no metabolismo energético.
• A localização subcelular do PR abrange o núcleo, citoplasma e membrana externa mitocondrial, com transporte dinâmico influenciado pela ligação hormonal e modificações pós-traducionais.
• A expressão específica do tecido é altamente regulada nos tecidos reprodutivos: no epitélio uterino, a isoforma B predomina durante a fase proliferativa, enquanto a isoforma A é a forma principal no estroma. O equilíbrio entre as isoformas PR é crítico para a progressão normal do ciclo menstrual e a função endometrial.
• O PR está sujeito a múltiplas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, palmitoilação e SUMOilação (conjugação ubl), que modulam sua atividade, estabilidade e tráfego subcelular.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1–250 do PR humano (NP_000917.3), uma região que abrange o domínio N-terminal exclusivo da isoforma B e uma parte compartilhada com a isoforma A. Embora o anticorpo possa reconhecer ambas as isoformas, considere a detecção específica da isoforma verificando os padrões de banda (pesos moleculares previstos: PR-B ~116 kDa, PR-A ~94 kDa; no entanto, as bandas observadas podem mudar devido a modificações) no sistema de amostra relevante.
• Para Western blotting, use controles positivos apropriados, como linhagens de células de câncer de mama T47D ou MCF-7, ou lisados de tecidos uterinos/endometriais. O peso da proteína previsto é de 99 kDa com base na entrada UniProt, mas modificações pós-traducionais e diferenças de isoforma podem resultar em múltiplas bandas.
• Em imuno-histoquímica (seções embebidas em parafina, IHC-P), otimize a recuperação de antígeno e a diluição do anticorpo usando tecidos com expressão conhecida de PR (por exemplo, endométrio humano, carcinoma de mama). A coloração nuclear é esperada; a coloração citoplasmática ou mitocondrial também pode ser observada.
• Para ELISA, certifique-se de que a configuração do antígeno de revestimento ou do anticorpo de captura seja compatível com a detecção policlonal; valide com proteína PR recombinante ou lisados celulares.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato é relatada; no entanto, devido a variações de sequência específicas da espécie, confirme a reatividade em seu modelo experimental.

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