Anticorpo policlonal de coelho anti-Proibitina para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P35232

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da Proibitina

• A Proibitina 1 (PHB; PHB1) é uma proteína altamente conservada com funções pleiotrópicas, incluindo atividade de chaperona mitocondrial, corregulação da transcrição nuclear e sinalização da membrana plasmática, atuando de maneira específica para cada compartimento celular e tecido (PubMed:11302691, PubMed:20959514, PubMed:28017329). Referências relacionadas: PMID:11302691, PMID:20959514, PMID:28017329
• Nas mitocôndrias, a PHB forma grandes complexos em anel com a PHB2 na membrana interna, funcionando como uma chaperona que estabiliza as enzimas respiratórias, regula a remodelação da cardiolipina e é essencial para a morfogênese mitocondrial e a longevidade (PubMed:11302691). Esse complexo também atua como receptor de mitofagia (PubMed:28017329). Referências relacionadas: PMID:11302691, PMID:28017329
• A PHB medeia a imunidade inata antiviral mitocondrial ao ativar a transdução de sinal do RIG-I, levando à produção de interferon do tipo I (IFNB1) e da citocina pró-inflamatória IL6 (PubMed:31522117). Referências relacionadas: PMID:31522117
• No núcleo, a PHB atua como correguladora transcricional, aumentando a ligação ao promotor de TP53 e reprimindo E2F1, influenciando assim o ciclo celular e a apoptose (PubMed:14500729). Ela também interage com STAT3 para regular a secreção de IL17 nas células Th17 (PubMed:31899195). Referências relacionadas: PMID:14500729, PMID:31899195
• Na membrana plasmática, a PHB coopera com CD86 nos linfócitos B para modular a produção de IgG1 e é necessária para a ativação de NF-kappa-B mediada por CD40.
• Amplamente expressa nos tecidos, a PHB localiza-se na membrana interna mitocondrial, no núcleo, no citoplasma e na membrana celular. Está sujeita a acetilação e fosforilação e está implicada nas interações hospedeiro-vírus e no envelhecimento celular.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno (aa 73–272) tem como alvo a região central/C-terminal da PHB humana; verifique a homologia da sequência ao trabalhar com outras espécies.
• Para Western blot, espere uma banda em aproximadamente 30 kDa sob condições padrão de redução; valide com controles positivos (por exemplo, HeLa, HepG2) e considere controles de carregamento.
• Para IHC-P, pode ser necessária a recuperação antigênica (por exemplo, tampão de citrato, pH 6,0); otimize a diluição do anticorpo e o sistema de detecção para o seu tipo de tecido.
• Para IF/ICC, otimize a fixação/permeabilização para preservar os epítopos mitocondriais e nucleares; recomenda-se a coloração simultânea com marcadores de organelas.
• Por ser um anticorpo policlonal, avalie a consistência entre lotes para ensaios quantitativos; considere a realização de experimentos-piloto para verificar a reprodutibilidade.

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