Anticorpo monoclonal anti-hidroxilase de prolina PHD1 (EGLN2) para WB - Q96KS0

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da hidroxilase de prolina PHD1 (EGLN2)

• A hidroxilase de prolina EGLN2 (também conhecida como PHD1, HIF-PH1 e EIT6) atua como um sensor celular de oxigênio que catalisa a hidroxilação de resíduos de prolina nas subunidades alfa do fator induzível por hipóxia (HIF-α), reconhecendo preferencialmente o motivo LXXLAP. Referências relacionadas: PMID:11595184 PMID:12039559 PMID:15925519

• Em condições normóxicas, a EGLN2 hidroxila prolinas específicas nos domínios de degradação dependentes de oxigênio de HIF1A e HIF2A, direcionando-os para ubiquitinação mediada por VHL e degradação proteassômica, enquanto a hipóxia atenua essa reação, estabilizando o HIF-α e promovendo a expressão de genes hipóxicos. Referências relacionadas: PMID:11595184 PMID:12039559 PMID:12181324 PMID:15925519

• Além da regulação de HIF, a EGLN2 hidroxila outros substratos: CEP192, conectando a detecção de oxigênio à dinâmica dos centrossomos e à formação de cílios primários; IKBKB, mediando a ativação de NF-κB na hipóxia; e ATF4, reduzindo sua estabilidade proteica (hidroxilação de ATF4 por similaridade). Referências relacionadas: PMID:23932902 PMID:17114296

• A EGLN2 localiza-se predominantemente no núcleo, em conformidade com seu papel na modulação de fatores de transcrição e de eventos de sinalização nuclear.

• A expressão tecidual é ampla, com níveis mais elevados no cérebro adulto, placenta, pulmão, rim e testículo; também está presente no coração, fígado, músculo esquelético e tecidos responsivos a hormônios, como os epitélios mamário e ovariano.

• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação e ubiquitinação, e a proteína requer ferro e vitamina C como cofatores para sua atividade dioxigenase; a iniciação alternativa gera isoformas.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O anticorpo foi produzido utilizando um peptídeo sintético abrangendo os aminoácidos N-terminais 1–100 da EGLN2 humana; ele pode reconhecer tanto a proteína de comprimento completo quanto variantes N-terminais. Considere o alinhamento de sequências caso a reatividade cruzada com outras espécies ou isoformas seja crítica.
• Para Western blot, espera-se uma banda de aproximadamente 44 kDa; valide a detecção no seu tipo específico de amostra utilizando controles positivos e negativos apropriados.
• O anticorpo é validado para ELISA e apresenta reação cruzada com amostras humanas, de camundongo e de rato, facilitando estudos translacionais; recomenda-se otimizar as condições de revestimento e os sistemas de detecção.
• Como a expressão de EGLN2 é sensível ao oxigênio, considere realizar experimentos em condições normóxicas e hipóxicas para observar alterações induzidas pela hipóxia, utilizando reagentes para estabilizar o HIF-α, se necessário.

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