Anticorpo policlonal de coelho anti-fosfatase ácida prostática (ACPP) para WB, IHC-P, ELISA - P15309

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da fosfatase ácida prostática (ACPP)

• A fosfatase ácida prostática (ACPP) é uma tirosina-fosfatase não específica, também conhecida como 5'-nucleotidase (5'-NT), fosfatase ácida 3 e ecto-5'-nucleotidase, codificada pelo gene ACP3 e apresentando múltiplas isoformas devido ao splicing alternativo.
• Funciona como uma fosfatase ativa em pH ácido (4-6), desfosforilando monoésteres ortofosfato de alquila, arila e acila e proteínas fosforiladas; também apresenta atividade de fosfatase lipídica, inativando o ácido lisofosfatídico no plasma seminal. Referências relacionadas: PMID:10506173 PMID:15280042 PMID:20498373
• Atua como supressor tumoral no câncer de próstata ao desfosforilar ERBB2 e inativar a sinalização mediada por MAPK; além disso, funciona como ecto-5'-nucleotidase em neurônios do gânglio da raiz dorsal, gerando adenosina a partir de AMP para supressão da dor. Referência relacionada: PMID:20498373
• Forma fibrilas amiloides em folha beta (SEVI) no sêmen, que capturam vírions do HIV e intensificam a infecção; a formação de SEVI e o aumento da infecção pelo HIV podem ser inibidos por EGCG, pelo peptídeo WW61 e por surfen; também intensifica a infecção por XMRV. Referências relacionadas: PMID:18083097 PMID:19451623 PMID:19897482 PMID:21677644 PMID:19403677
• Localiza-se subcelularmente na membrana celular, na membrana lisossomal, no núcleo e no citosol, sendo também secretada.
• É altamente expressa nas células epiteliais glandulares e ductais normais da próstata, com níveis mais baixos no carcinoma prostático; também é detectada na bexiga, nos rins, no pâncreas, nos pulmões, no colo do útero, nos testículos, nos ovários e no músculo esquelético.
• Sofre modificações pós-traducionais como glicoproteína com ligações dissulfeto; existem múltiplas isoformas devido ao splicing alternativo e ao processamento proteolítico.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 33–386 da ACPP humana, excluindo o peptídeo-sinal; o anticorpo pode reconhecer tanto as formas completas quanto as processadas.
• Para western blot (WB), com peso proteico previsto de 45 kDa, considere utilizar condições redutoras e validar em lisados celulares ou teciduais com expressão conhecida.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), podem ser necessários protocolos de recuperação antigênica; recomenda-se testar em cortes de tecido prostático, dada a alta expressão na próstata normal.
• Devido à reatividade cruzada com camundongo e rato, valide o desempenho do anticorpo nessas espécies verificando a homologia de sequência e utilizando controles apropriados.
• Por ser um anticorpo policlonal, pode detectar múltiplas isoformas ou variantes de processamento; considere confirmar a especificidade das bandas com siRNA ou peptídeos bloqueadores.
• Para aplicações em ELISA, otimize as concentrações de revestimento e os sistemas de detecção secundária; a proteína ACPP recombinante pode ser utilizada como controle positivo.

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