Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-Proteinase 3/PR3 para WB, ELISA - P24158

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Mieloblastina/Proteinase 3 (PR3)

• Codificada pelo gene PRTN3, a Mieloblastina (Proteinase 3/PR3) é uma serina protease de 29 kDa armazenada em grânulos azurófilos de neutrófilos e também conhecida como autoantigénio de Wegener (C-ANCA).
• A PR3 degrada elastina, fibronectina, laminina, vitronectina e colagénios (tipos I, III e IV) in vitro, contribuindo para a remodelação tecidular e inflamação. Referências relacionadas: PMID:2033050 PMID:28240246 PMID:3198760
• Ao clivar e ativar o recetor de protease ativado por protease 2 (PAR-2/F2RL1), a PR3 melhora a função da barreira endotelial, mantendo assim a integridade vascular durante a migração transendotelial de neutrófilos. Referências relacionadas: PMID:23202369
• Em complexo com o CD177, a PR3 facilita a migração transendotelial de neutrófilos, uma etapa chave nas respostas imunes inatas. Referências relacionadas: PMID:22266279
• A PR3 desencadeia sinalização inflamatória em neutrófilos ao interagir com o recetor acoplado à proteína G de adesão G3 (ADGRG3) a montante da ativação do PAR-2. Referências relacionadas: PMID:36302784
• A nível subcelular, a PR3 localiza-se em grânulos citoplasmáticos, é secretada upon ativação dos neutrófilos e pode associar-se à membrana celular em rafts de membrana.
• A PR3 é predominantemente expressa em leucócitos polimorfonucleares e neutrófilos, com regulação positiva durante a diferenciação dos neutrófilos.
• A PR3 contém ligações dissulfeto e é glicosilada; é sintetizada como um zimogénio e ativada por clivagem proteolítica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio consiste numa proteína de fusão recombinante que cobre os aminoácidos 28-170 da PR3 humana, uma região que provavelmente abrange a enzima madura. Para análise por WB, considere o uso de condições redutoras e espere uma banda específica perto de 28 kDa.
• Para aplicações de ELISA, este anticorpo policlonal pode ser adequado como reagente de captura ou deteção; realize a titulação e validação adequadas no seu sistema de amostras específico.
• Como um anticorpo policlonal, pode ocorrer variabilidade entre lotes; recomendamos validar a especificidade usando controlos apropriados, como linhas celulares expressando PR3 e linhas celulares knockout.
• A reatividade cruzada com a PR3 de rato é indicada; verifique a homologia da sequência e o desempenho em amostras derivadas de rato, se necessário.

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