Anticorpo policlonal de coelho anti-protrombina (F2) para WB e ELISA - P00734

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da protrombina (F2)

• A protrombina (fator II da coagulação) é o precursor zimogênico da trombina, uma serina protease que desempenha um papel central na coagulação sanguínea, na hemostasia e na cicatrização de feridas.
• A trombina cliva ligações peptídicas após resíduos de arginina e lisina, convertendo o fibrinogênio solúvel em fibrina insolúvel para formar coágulos sanguíneos.
• Além do fibrinogênio, a trombina ativa os fatores de coagulação V, VII, VIII e XIII e, quando ligada à trombomodulina, ativa a proteína C, que exerce efeitos anticoagulantes.
• A trombina medeia a ativação do fator XI da coagulação (F11), um processo intensificado por superfícies carregadas negativamente. Referências relacionadas: PMID:2019570, PMID:21976677
• A trombina também desencadeia respostas pró-inflamatórias nas células endoteliais, induzindo a produção de citocinas como MCP-1/CCL2 e IL8/CXCL8. Referências relacionadas: PMID:30568593, PMID:9780208
• A protrombina é sintetizada principalmente no fígado e secretada no plasma, em conformidade com seu papel sistêmico na coagulação.
• A proteína contém vários domínios estruturais, incluindo domínios kringle e um domínio de ácido gama-carboxiglutâmico (GLA), que facilita a ligação dependente de cálcio às membranas.
• Modificações pós-traducionais, como a gama-carboxilação e a formação de pontes dissulfeto, são essenciais para sua atividade biológica.
• Mutações no gene F2 estão associadas à trombofilia e a distúrbios hemorrágicos.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno é uma proteína recombinante que abrange os aminoácidos 364–622 da protrombina humana, direcionando-se à região da cadeia pesada da trombina; esse desenho pode permitir a detecção tanto da protrombina quanto de fragmentos de trombina ativada.
• Para Western blot, espere uma banda principal em aproximadamente 70 kDa para a protrombina de comprimento completo sob condições redutoras; bandas adicionais de menor peso molecular podem aparecer devido ao processamento proteolítico.
• Como este é um anticorpo policlonal, valide o desempenho no seu sistema de amostra específico (por exemplo, plasma humano ou proteína recombinante) para confirmar a especificidade e a consistência entre lotes.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado como reagente de captura ou detecção; no entanto, a combinação com um anticorpo monoclonal não sobreposto pode melhorar a sensibilidade e reduzir o background.
• As diluições de trabalho e as condições de incubação ideais devem ser determinadas empiricamente para cada aplicação; dados publicados ou protocolos padrão podem servir como ponto de partida.

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