Anticorpo Policlonal Anti-PRSS1 para WB, IHC-P, ELISA - P07477

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PRSS1

• O PRSS1 codifica a serina protease 1, um membro da família das enzimas digestivas tripsina, também conhecida como tripsinogênio catiônico, tripsina-1 ou tripsina I aniônica.
• A proteína é secretada como um zimogênio inativo (tripsinogênio) e é ativada pela enteropeptidase no intestino delgado, onde cliva ligações peptídicas no lado carboxílico de aminoácidos básicos como arginina e lisina.
• Estudos funcionais mostram atividade contra substratos sintéticos Boc-Phe-Ser-Arg-Mec, Boc-Leu-Thr-Arg-Mec, Boc-Gln-Ala-Arg-Mec e Boc-Val-Pro-Arg-Mec, sendo a forma de cadeia única mais ativa que a forma de duas cadeias.
• Contém ligações dissulfeto e liga-se ao cálcio, o que estabiliza a enzima e previne a autólise, conforme indicado por estudos estruturais.
• A localização subcelular é principalmente extracelular, sendo secretada para o lúmen intestinal e espaço extracelular para realizar sua função proteolítica na digestão.
• A proteína é classificada sob palavras-chave como secretada, serina protease, zimogênio, ligação dissulfeto, cálcio, ligação a metal, digestão e hidrolase.
• O PRSS1 é distinto de outras isoformas da tripsina (ex.: PRSS2, PRSS3), mas compartilha homologia de sequência significativa; é predominantemente expresso no pâncreas e é um componente do proteoma de referência.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 24–247 do PRSS1 humano (região da tripsina madura), portanto, o anticorpo pode reconhecer tanto a forma proenzima (tripsinogênio) quanto as formas ativas de tripsina; considere isso ao projetar estudos de estado de ativação.
• Para Western blot (WB), o tamanho previsto da banda é de aproximadamente 24 kDa; no entanto, observe que modificações pós-traducionais (ex.: sulfatação) ou processamento do zimogênio podem causar pequenos desvios.
• Na imuno-histoquímica (IHC-P), note que o PRSS1 é altamente abundante no pâncreas; valide o anticorpo em controles positivos (ex.: pâncreas) e negativos (ex.: tecidos não secretores) apropriados para avaliar a especificidade.
• A reatividade cruzada é relatada para humano e rato; para experimentos envolvendo camundongo ou outras espécies, verifique a reatividade de forma independente devido a possíveis diferenças de sequência entre as isoformas da tripsina.
• Para aplicações de ELISA, a natureza policlonal do anticorpo permite a captura ou detecção de PRSS1 em fluidos biológicos como soro ou suco pancreático; no entanto, considere a otimização da diluição e a interferência de outras proteases semelhantes à tripsina.
• Dada a alta similaridade de sequência dentro da família da tripsina, avalie a possível reatividade cruzada com PRSS2 ou PRSS3 se estiver trabalhando com amostras onde múltiplas isoformas podem estar presentes.

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