Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-PSA/KLK3 para WB, ELISA - P07288

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PSA/KLK3

• O antígeno específico da próstata (PSA), também referido como gama-seminoproteína, calicreína-3 (KLK3), antígeno P-30 ou semenogelase, é um membro da família das calicreínas teciduais de serina proteases codificada pelo gene KLK3 (GeneID 354).
• A proteína é sintetizada como uma pré-pró-enzima, processada em um zimogênio e, finalmente, ativada por clivagem para produzir a glicoproteína madura de ~29 kDa (UniProt: P07288).
• O PSA é predominantemente expresso em células epiteliais da próstata e secretado para o plasma seminal e soro; sua natureza secretada é confirmada pela palavra-chave "Secreted" e anotação de localização subcelular.
• Sua função fisiológica principal é a hidrólise da semenogelina-1, a principal proteína formadora de gel no sêmen, resultando na liquefação do coágulo seminal e facilitação da motilidade dos espermatozoides.
• O PSA pertence à família estendida de calicreínas agrupadas no cromossomo 19; o splicing alternativo do gene KLK3 gera múltiplas isoformas.
• A proteína é extensivamente modificada pós-traducionalmente, incluindo formação de pontes dissulfeto, glicosilação e processamento proteolítico a partir do zimogênio; contém um peptídeo sinal para secreção.
• Estudos estruturais (palavra-chave 3D-structure) elucidaram o tríade catalítico e o bolso de ligação ao substrato típicos de serina proteases semelhantes à tripsina.
• O PSA foi identificado diretamente por sequenciamento de proteínas e proteômica, servindo como uma proteína de referência para o proteoma humano (palavras-chave: Direct protein sequencing, Proteomics identification, Reference proteome).

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a uma sequência dentro da proteína PSA madura (aminoácidos 162–261), evitando as regiões do peptídeo sinal e pró-peptídeo. Esta região é provável de gerar anticorpos que reconhecem tanto o PSA livre quanto o PSA complexado a inibidores.
• Para análise de Western blot (WB), é recomendado um protocolo de SDS-PAGE redutor; espere uma banda correspondente à proteína madura em aproximadamente 29 kDa. Linhagens celulares derivadas da próstata (ex., LNCaP) ou plasma seminal humano podem servir como controles positivos.
• Ao desenvolver ensaios de ELISA, o emparelhamento deste anticorpo monoclonal com um anticorpo de detecção contra um epítopo não sobreposto pode aumentar a sensibilidade. Valide o desempenho com padrões de PSA recombinante e amostras clínicas para confirmar a especificidade.
• Observe que este anticorpo é validado para PSA humano; reatividade cruzada com outras calicreínas não foi relatada.

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