Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-PSAP (Validado por KD) para WB, IHC-P, ELISA - P07602

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PSAP

• A prosaposina (PSAP) é uma proteína precursora que é clivada proteoliticamente para gerar quatro peptídeos saposina homólogos (saposina A, B, C e D), cada um funcionando como proteínas ativadoras não enzimáticas para enzimas lisossômicas específicas de degradação de esfingolipídios.
• As saposinas facilitam a hidrólise de esfingolipídios extraindo substratos lipídicos das membranas e os apresentando às suas respectivas enzimas, com especificidades de lipídios e enzimas distintas, mas parcialmente sobrepostas entre os membros da família.
• A PSAP também atua como um fator mielinotrófico e neurotrófico, mediando seus efeitos por meio dos receptores acoplados à proteína G GPR37 e GPR37L1, levando à internalização do receptor e à sinalização por fosforilação de ERK.
• Como cofator lisossômico essencial, a PSAP/saposinas ativam várias enzimas: galactocerebrosidase (GALC) para galactosilceramida, arilsulfatase A para sulfatídeos, beta-galactosidase para gangliosídeos GM1, alfa-galactosidase A para globotriaosilceramida e beta-glicosilceramidase ácida (glicocerebrosidase) para glicosilceramida.
• A saposina D estimula principalmente a ceramidase ácida e a esfingomielinase ácida, sendo o catabolismo da ceramida o seu papel fisiológico principal.
• Subcelularmente, a prosaposina está localizada nos lisossomos e também é secretada; está envolvida no metabolismo de glicoesfingolipídios e tem sido implicada em distúrbios neurodegenerativos como a doença de Gaucher, a doença de Parkinson e a leucodistrofia metacromática.
• A proteína sofre splicing alternativo e contém pontes dissulfeto; seu peso molecular é de aproximadamente 58 kDa.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo monoclonal foi gerado usando um fragmento recombinante correspondente aos aminoácidos 275–524, que abrange os domínios saposina B, C e D; portanto, ele pode detectar tanto a prosaposina de comprimento completo quanto suas formas de saposina processadas em tipos de amostras relevantes.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto da prosaposina de comprimento completo é de 58 kDa; bandas adicionais correspondentes a saposinas individuais (~10–15 kDa) podem ser observadas dependendo do processamento lisossômico. Considere otimizar as condições de preparação e carregamento da amostra.
• Para imunohistoquímica, valide em tecidos conhecidos por expressar altos níveis de PSAP, como cérebro, rim e baço, e considere marcadores de enriquecimento lisossômico para colocalização.
• Para ELISA, pareie com um anticorpo de captura ou padrão de antígeno cuidadosamente selecionado e valide no sistema de amostra relevante para garantir especificidade e sensibilidade.

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