Anti-PSD95 Anticorpo Monoclonal de Coelho para WB, ELISA - P78352

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PSD95

• Disks large homolog 4 (DLG4), também conhecido como proteína 95 de densidade pós-sináptica (PSD-95) ou proteína 90 associada à sinapse (SAP90), é um membro da família de guanilato quinases associadas à membrana (MAGUK). Funciona como uma proteína de andaime pós-sináptica crítica.
• O PSD95 agrupa receptores NMDA e canais de potássio tipo shaker na membrana pós-sináptica, organizando a densidade pós-sináptica (PSD) e regulando a força sináptica.
• É necessário para a plasticidade sináptica associada à sinalização do receptor NMDA; a superexpressão ou depleção de DLG4 altera a razão de sinapses excitatórias para inibitórias em neurônios hipocampais.
• O PSD95 imobiliza receptores de glutamato do tipo AMPA (AMPARs) na PSD, mantendo-os em um estado ativado e prevenindo a depressão sináptica.
• Sob condições basais, o PSD95 coopera com FYN para estabilizar a palmitoiltransferase ZDHHC5 na membrana sináptica, inibindo sua endocitose. Referências relacionadas: PMID:26334723
• O PSD95 é predominantemente expresso no cérebro e localiza-se na membrana celular, densidade pós-sinariptica, espinhas dendríticas e compartimentos pré-sinápticos.
• Modificações pós-traducionais incluem palmitoilação, que o ancora à membrana, e fosforilação. O splicing alternativo gera múltiplas isoformas, e mutações estão associadas à deficiência intelectual.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 1-100 do PSD95 humano, visando a região N-terminal. Verifique se o preparo da sua amostra mantém este epítopo.
• Para Western blotting, o PSD95 migra em aproximadamente 80 kDa. Use uma porcentagem de gel apropriada (por exemplo, 8–10%) e otimize as condições de transferência para proteínas de alto peso molecular.
• As diluições iniciais recomendadas para WB podem variar de 1:500 a 1:2000, mas a otimização individual é necessária com base no tipo de amostra e no sistema de detecção.
• O anticorpo reage cruzadamente com camundongo e rato, tornando-o adequado para lisados de cérebro de roedores e seções de tecido; valide em seu sistema modelo específico.
• Para ELISA, revestir com o peptídeo imunizante ou proteína recombinante a 1–10 µg/mL e titular o anticorpo para determinar a concentração de trabalho ideal.

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