Anticorpo policlonal de coelho anti-PSIP1 para WB, ELISA - O75475

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da PSIP1

• A PSIP1, também conhecida como LEDGF, DFS70, p75/p52 e PAIP, é um coativador transcricional que desempenha um papel fundamental na diferenciação de células-tronco neuroepiteliais e na neurogênese, especialmente na regulação gênica das células epiteliais do cristalino e nas respostas ao estresse.
• A proteína existe em múltiplas isoformas; a isoforma 2 (p75) atua como um coativador transcricional mais geral e potente e também pode funcionar como um adaptador para coordenar o splicing do pré-mRNA, enquanto a isoforma 1 (p52) é menos caracterizada.
• A PSIP1 atua como cofator celular para a integração lentiviral, ancorando os complexos de pré-integração à cromatina do hospedeiro por meio de seu domínio de ligação à integrase, uma função essencial para a replicação do HIV-1.
• A localização subcelular é exclusivamente nuclear, em consonância com seus papéis na transcrição, no splicing e na integração viral.
• A proteína é amplamente expressa, com níveis mais elevados no timo e expressão acentuada no cérebro fetal e adulto, incluindo a zona subventricular, o hipocampo e o neuroepitélio germinativo; a expressão é significativamente maior no cérebro fetal do que no adulto.
• As modificações pós-traducionais incluem fosforilação, citrulinação e conjugação com ubiquitina, que podem regular sua atividade e suas interações.
• As características estruturais adicionais incluem um domínio de hélice enrolada e uma região de ligação ao DNA, facilitando sua associação à cromatina e a regulação transcricional.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Este anticorpo foi gerado utilizando um imunógeno de proteína recombinante abrangendo os aminoácidos 301-530 da PSIP1 humana, correspondente à região C-terminal que engloba o domínio de ligação à integrase e parte do domínio de hélice enrolada; espera-se que reconheça ambas as principais isoformas (p75 e p52).
• Para Western blot (WB), considere utilizar extratos nucleares de linhagens celulares relevantes, como HeLa ou precursores neuronais, e observe a banda prevista em torno de 60 kDa; devido à variação entre isoformas e às modificações pós-traducionais, várias bandas podem ser observadas.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato torna este anticorpo adequado para estudos comparativos em modelos de roedores, mas valide-o no sistema de amostra relevante para confirmar a especificidade.
• Para ELISA, considere utilizar proteínas recombinantes ou antígenos peptídicos para avaliar a afinidade de ligação; o ELISA direto pode ser utilizado para a determinação do título, enquanto o ELISA sanduíche pode exigir anticorpos pareados.

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