Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-PSMA/FOLH1 para WB, IF-P, ELISA - Q04609

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PSMA/FOLH1

• A PSMA/FOLH1, também conhecida como carboxipeptidase de glutamato 2, folato hidrolase 1 e NAALADase I, é uma metaloprotease multifuncional de zinco codificada pelo gene FOLH1. Ela apresenta atividade tanto de folato hidrolase quanto de N-acetilada-alfa-ligada dipeptidase (NAALADase).
• A enzima hidrolisa preferencialmente peptídeos de tri-alfa-glutamato. No intestino, é essencial para a captação de folato da dieta; no cérebro, modula a neurotransmissão excitatória ao hidrolisar o neuropeptídeo NAAG para liberar glutamato.
• A PSMA/FOLH1 também possui atividade do tipo dipeptidil-peptidase IV, pois cliva o Gly-Pro-AMC in vitro.
• A proteína é uma proteína de membrana de passagem única do tipo II, localizada predominantemente na membrana celular, mas também é encontrada no citoplasma.
• O FOLH1 é altamente expresso no epitélio prostático e detectado em uma ampla gama de tecidos, incluindo bexiga urinária, rim, testículo, ovário, trompa de Falópio, mama, glândula adrenal, fígado, esôfago, estômago, intestino delgado, cólon e cérebro. Também é expresso no endotélio capilar de vários tumores.
• No câncer de próstata, isoformas distintas são expressas: a isoforma PSMA-1 é mais abundante em tumores primários, a isoforma PSMA-9 é expressa especificamente no câncer de próstata, enquanto a isoforma PSMA' predomina na próstata normal.
• A proteína sofre modificações pós-traducionais, incluindo glicosilação e fosforilação, e requer íons zinco e cálcio para sua atividade catalítica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína de fusão recombinante que abrange o domínio citoplasmático N-terminal (aminoácidos 1–106) da PSMA/FOLH1 humana. Esta região é relativamente conservada; no entanto, a reatividade cruzada com rato foi relatada, portanto, recomenda-se a validação na espécie de interesse.
• Para Western blot, é esperada uma banda em torno de 84 kDa. Dada a natureza glicoproteica, a banda observada pode aparecer ligeiramente maior ou mais larga. O bloqueio ideal e a diluição do anticorpo devem ser determinados empiricamente.
• Em imunofluorescência (IF-P), considere usar permeabilização para permitir o acesso ao epítopo intracelular. A co-coloração com um marcador de membrana plasmática pode ajudar a confirmar a localização.
• Para ELISA, o anticorpo pode ser usado para capturar ou detectar a PSMA/FOLH1 humana em amostras como lisados de células ou extratos de tecidos, mas a compatibilidade do par sanduíche deve ser verificada.

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