Anti-PSMB10 Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P40306

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PSMB10

• O PSMB10 codifica a subunidade beta tipo-10 do proteassoma, também conhecida como LMP10, MECL1 ou beta2i, um componente catalítico do imunoproteassoma que substitui as subunidades constitutivas do proteassoma após estimulação imune.
• Exibe atividades semelhantes à quimotripsina e tripsina, clivando ligações peptídicas após resíduos hidrofóbicos e básicos, e é essencial para a geração de peptídeos antigênicos apresentados por moléculas MHC de classe I.
• O PSMB10 é induzido por interferon-gama e incorporado ao imunoproteassoma, alterando a especificidade de clivagem para favorecer a produção de peptídeos com maior afinidade de ligação ao MHC de classe I, melhorando assim as respostas imunes adaptativas.
• A proteína está localizada tanto no citoplasma quanto no núcleo, onde participa da proteólise dependente e independente de ubiquitina, contribuindo para o controle de qualidade das proteínas e regulação do ciclo celular.
• Modificações pós-traducionais incluem acetilação e fosforilação, e a proteína é sintetizada como um zimogênio inativo que é ativado pela remoção autocatalítica de seu pró-peptídeo.
• Mutações no PSMB10 foram associadas a síndromes autoinflamatórias associadas ao proteassoma (por exemplo, PRAAS5), destacando a importância clínica da função adequada do imunoproteassoma.
• O PSMB10 interage com proteínas virais e sua atividade de protease pode ser modulada durante interações hospedeiro-vírus, influenciando potencialmente o processamento de antígenos virais e a evasão imune.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado corresponde à proteína PSMB10 humana de comprimento total (aminoácidos 1-273), garantindo que o anticorpo policlonal reconheça múltiplos epítopos nativos; para WB, espera-se uma banda próxima a 29 kDa, embora formas precursoras possam estar visíveis.
• Em IHC-P e IF/ICC, antecipe padrões de coloração citoplasmática e nuclear; a coloração simultânea com marcadores de proteassoma ou imunoproteassoma (por exemplo, PSMB8, PSMB9) pode ajudar a confirmar a especificidade.
• Para aplicações de ELISA, considere o uso de complexos de imunoproteassoma recombinantes ou PSMB10 purificado como antígenos de revestimento para estabelecer a sensibilidade e a faixa dinâmica do ensaio.
• Devido à alta homologia de sequência, prevê-se que o anticorpo reaja cruzadamente com o PSMB10 de camundongo e rato; no entanto, verifique sempre a reatividade em sua espécie e tecido de interesse usando controles apropriados (por exemplo, lisados de tecidos de modelos selvagens e knockout).
• Ao estudar a dinâmica do imunoproteassoma, o tratamento com interferon-gama ou outros estímulos imunes pode ser usado para aumentar a expressão do PSMB10 em células cultivadas; inclua controles não tratados para diferenciar a expressão constitutiva da indutível.
• Para estudos funcionais, inibidores do proteassoma (por exemplo, epoxomicina, bortezomibe) podem ser empregados para validar a especificidade do anticorpo bloqueando a atividade catalítica, mas note que o tratamento com inibidor pode afetar a composição das subunidades.

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