Anti-PSMD14 Anticorpo Policlonal de Coelho para WB, IF/ICC, ELISA - O00487

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PSMD14

• O PSMD14, também conhecido como POH1 ou RPN11, é um componente da subunidade reguladora do proteassoma 26S, um complexo multiproteico grande responsável pela degradação dependente de ATP de proteínas ubiquitinadas, crucial para a homeostase proteica, progressão do ciclo celular, apoptose e reparo de DNA. Referências relacionadas: PMID:9374539 PMID:1317798

• Funciona como uma metaloprotease que cliva especificamente cadeias de poliubiquitina ligadas ao 'Lis-63' dentro do proteassoma 26S, uma atividade de desubiquitinação crítica necessária para o processamento de substratos e reciclagem de ubiquitina. Referências relacionadas: PMID:22909820

• No reparo de danos ao DNA, o PSMD14 promove a junção de extremidades não homólogas (NHEJ) removendo poliubiquitina ligada ao Lis-63, facilitando a retenção cromossômica de JMJD2A/KDM4A e limitando o acúmulo de TP53BP1; também aumenta a recombinação homóloga apoiando o carregamento de RAD51. Referências relacionadas: PMID:22909820

• Além disso, o PSMD14 regula a macroautofagia garantindo o transporte retrógrado do Golgi para o ER por meio de sua atividade de desubiquitinação, prevenindo a localização incorreta de proteínas de autofagia essenciais e permitindo a formação adequada de autofagossomos. Referências relacionadas: PMID:32210007

• A proteína é amplamente expressa, com os níveis mais altos no coração e no músculo esquelético, refletindo seu papel essencial de manutenção.

• Principais características estruturais e funcionais incluem seu domínio de metaloprotease com ligação de zinco e sua classificação como uma protease de tiol; também é uma fosfoproteína e parte da via de conjugação de ubiquitina.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado corresponde aos aminoácidos 160-300 do PSMD14 humano, uma região prevista para ser exposta e conservada entre espécies, o que pode contribuir para a reatividade cruzada do anticorpo com camundongo e rato.
• Para Western blot (WB), a banda esperada está em ~35kDa; considere usar controles de carregamento apropriados e valide o sinal com lisatos de siRNA ou knockout para confirmar a especificidade.
• Na imunofluorescência/imunocitoquímica (IF/ICC), inclua controles negativos (por exemplo, apenas anticorpo secundário) e verifique a localização com marcadores de organelas, pois o PSMD14 se associa ao proteassoma em compartimentos citoplasmáticos e nucleares.
• Para ELISA, realize experimentos de titulação para determinar a concentração ótima do antígeno de revestimento e do anticorpo; o desempenho do anticorpo deve ser validado na matriz de amostra relevante.

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