Anticorpo Policlonado de Coelho Anti-PSMD4 para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P55036

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PSMD4

• PSMD4, também conhecido como RPN10, S5A, AF, ASF e fator antissecretor 1, é a subunidade regulatória não ATPase 4 do proteassomo 26S, codificada pelo gene PSMD4 (GeneID: 5710).
• Ele atua como uma subunidade receptora de ubiquitina essencial para a degradação dependente de ATP de proteínas ubiquitinadas, reconhecendo e ligando cadeias de poliubiquitina para direcionar os substratos à destruição pelo proteassomo.
• Ao facilitar a remoção de proteínas mal dobradas, danificadas ou desnecessárias, PSMD4 desempenha um papel central na homeostase proteica e participa de processos celulares críticos, incluindo progressão do ciclo celular, apoptose e reparo de danos no DNA.
• PSMD4 apresenta uma preferência marcada por cadeias de poliubiquitina mais longas, aumentando a eficiência e a seletividade da via ubiquitina-proteassomo.
• Modificações pós-traducionais como a fosforilação regulam a função de PSMD4, e o splicing alternativo produz múltiplas isoformas com papéis potencialmente distintos.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para western blotting (WB), imunoprecipitação (IP) e ELISA, o imunógeno cobre a sequência completa de PSMD4 (aminoácidos 1-377); considere usar controles positivos de linhagens celulares humanas ou de rato conhecidas por expressarem PSMD4.
• Na imunofluorescência (IF/ICC), métodos adequados de fixação e permeabilização devem ser otimizados, pois PSMD4 pode se localizar tanto nos compartimentos citoplasmático quanto nuclear, dependendo do tipo celular e das condições experimentais.
• Ao projetar experimentos de co-IP, observe que Rpn10/PSMD4 interage transitoriamente com a tampa do proteassomo; inclua buffers de eluição apropriados e confirme a integridade do complexo com anticorpos contra subunidades do proteassomo.
• Os fatores de diluição devem ser determinados empiricamente; recomenda-se a realização de experimentos piloto no sistema de detecção relevante para estabelecer as concentrações de trabalho ótimas para cada aplicação.

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