Anticorpo Monoclonal Coelho Anti-PTBP2 para WB, IP, IF e IHC - Q9UKA9

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PTBP2

• PTBP2 (proteína de ligação ao trato de polipirimidina 2) é uma proteína de ligação ao RNA também conhecida como PTB neural (nPTB), proteína semelhante à PTB (PTBLP) ou brPTB. Pertence à família hnRNP e é o homólogo enriquecido neural/neuronal do PTBP1 ubíquo.
• Liga-se a tratos de polipirimidina intrônicos e medeia a regulação negativa do splicing de éxons. Em tecidos neuronais, pode antagonizar o ativador de splicing NOVA1 para ajustar finamente a seleção alternativa de éxons.
• Desempenha funções adicionais na regulação da tradução, ligando o controle pós-transcricional aos resultados da expressão gênica.
• Localiza-se predominantemente no núcleo, consistente com seu papel principal no processamento de pré-mRNA.
• PTBP2 sofre várias modificações pós-traducionais, incluindo acetilação e fosforilação, que podem modular sua atividade, dinâmica subcelular ou interações proteicas.
• A proteína é expressa principalmente no cérebro, mas também é detectada no coração e músculo esquelético. Existem múltiplas isoformas: as isoformas 1 e 2 são específicas de neurônios, as isoformas 3 e 4 estão presentes em tecidos não neuronais, e as isoformas 5 e 6 são formas truncadas em células não neuronais.
• Exibe afinidade de ligação ao RNA inerente reduzida em comparação com o PTBP1, uma propriedade que pode influenciar seus papéis regulatórios em diferentes contextos celulares.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogênio é um peptídeo N-terminal (aa 1–100) do PTBP2 humano, uma região altamente conservada entre humano, rato e rato. Essa conservação provavelmente está na base da reatividade cruzada relatada.
• Para análise por Western blot, é antecipada uma banda predominante próxima a 57 kDa correspondente ao PTBP2 de comprimento total. Bandas adicionais podem surgir de isoformas alternativas ou modificações pós-traducionais; verifique a especificidade usando controles apropriados.
• Na imunoprecipitação, considere ligar covalentemente o anticorpo a contas de proteína A/G para minimizar a co-eluição de cadeias pesadas/leves se estas interferirem na detecção subsequente.
• Para imunofluorescência (IF/ICC) e imuno-histoquímica (IHC-P), a localização nuclear do PTBP2 deve ser confirmada. Otimize a fixação (por exemplo, PFA a 4% para IF, seções em parafina fixadas em formalina para IHC) e a permeabilização (por exemplo, Triton X-100 a 0,1–0,2%) para obter recuperação de epítopo adequada e clareza de sinal.
• Como a expressão de PTBP2 é mais alta em tecidos neuronais, use tecido cerebral ou linhagens de células neuronais como controles positivos; células não neuronais podem expressar níveis mais baixos ou isoformas distintas.
• Ao usar ELISA, certifique-se de que o antígeno de revestimento preserve a conformação nativa da região N-terminal para manter a ligação do anticorpo.

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