Anticorpo Monoclonal Anti-PTEN para WB, IF/ICC, IP, ELISA - P60484

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PTEN

• PTEN (homólogo de fosfatase e tensina) é uma proteína fosfatase de dupla especificidade e fosfatase de lipídios, atuando como um supressor de tumores crítico. O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1-403 da isoforma canônica (UniProt P60484).
• Como fosfatase de lipídios, o PTEN desfosforila o fosfatidilinositol 3,4,5-trisfosfato (PtdIns(3,4,5)P3) para antagonizar a via de sinalização PI3K-AKT/PKB, modulando assim a progressão do ciclo celular, a sobrevivência e o metabolismo. Referências relacionadas: PMID:31492966 PMID:37279284
• Também funciona como uma fosfatase de proteínas, desfosforilando proteínas fosforiladas em tirosina, serina e treonina, impactando diversas cascatas de sinalização. Referências relacionadas: PMID:9187108 PMID:9256433 PMID:9616126
• O PTEN localiza-se em múltiplos compartimentos subcelulares, incluindo o citoplasma, núcleo, corpos PML, espinhas dendríticas, densidade pós-sináptica e pode ser secretado, refletindo seus papéis multifacetados.
• É expresso em níveis relativamente altos em todos os tecidos adultos, incluindo coração, cérebro, placenta, pulmão, fígado, músculo, rim e pâncreas.
• O PTEN desempenha um papel fundamental na migração celular ao desfosforilar a quinase de adesão focal e interagir com complexos DLC1/TNS3 para regular a ativação de RHOA e RAC1 na borda frontal e na parte posterior das células em migração. Referências relacionadas: PMID:22279049 PMID:26166433
• Modificações pós-traducionais, como a monoubiquitinação, influenciam a localização subcelular e a função apoptótica do PTEN; o PTEN monoubiquitinado nuclear exibe maior potencial apoptótico. Referências relacionadas: PMID:10468583 PMID:18716620

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange quase todo o comprimento do PTEN humano (aa 1-403), portanto, espera-se que o anticorpo reconheça o PTEN total, independentemente do estado de fosforilação. Para Western blot, considere incluir inibidores de fosfatases em seu tampão de lise para preservar os padrões de fosforilação endógena do PTEN.
• O PTEN migra a aproximadamente 47 kDa em SDS-PAGE; use marcadores de peso molecular apropriados e execute controles positivos/negativos adequados (por exemplo, lisados de células com PTEN nocauteado) para confirmar a identidade da banda.
• Para imunoprecipitação, teste diferentes proporções de anticorpo para lisado e condições de incubação para otimizar a eficiência de captura. O desempenho do anticorpo em IP foi demonstrado; no entanto, sistemas experimentais individuais podem exigir otimização.
• Em imunofluorescência/ICC, o PTEN exibe coloração tanto citoplasmática quanto nuclear. Os métodos de fixação e permeabilização podem afetar significativamente os padrões de localização; valide a colorização em sua linhagem celular com perfis de expressão de PTEN conhecidos e use controles de isotipo.

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