Anticorpo Policlonal Anti-PTEN para IHC-P, IF/ICC, ELISA - P60484

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PTEN

• PTEN (homólogo de fosfatase e tensina) é uma fosfatase de especificidade dupla que desfosforila substratos proteicos fosforilados em tirosina, serina e treonina. Referências relacionadas: PMID:9187108 PMID:9256433 PMID:9616126
• Também funciona como uma fosfatase de lipídeos, hidrolisando preferencialmente o fosfato na posição D3 do fosfatidilinositol 3,4,5-trisfosfato (PtdIns(3,4,5)P3), antagonizando assim a via de sinalização PI3K-AKT para controlar a progressão do ciclo celular e a sobrevivência. Referências relacionadas: PMID:16824732 PMID:26504226 PMID:9593664
• O PTEN é um importante supressor tumoral; a sua perda leva à ativação constitutiva do PI3K-AKT, promovendo a proliferação descontrolada e contribuindo para muitos tipos de cancro. Referências relacionadas: PMID:31492966 PMID:37279284
• A fosforilação do PTEN modula a sua ligação ao DLC1 e ao MAGI2, regulando a migração e polarização celulares; a forma não fosforilada coopera com o MAGI2 para suprimir a ativação do AKT1. Referências relacionadas: PMID:11707428 PMID:26166433
• Em células móveis, o PTEN desfosforila a quinase de adesão focal (FAK) e suprime a formação de pseudópodes laterais, inibindo a migração celular e o espalhamento celular mediado por integrinas. Referências relacionadas: PMID:22279049
• O PTEN encontra-se no citoplasma, núcleo, corpos PML e espaços secretados; nas densidades pós-sinápticas e espinhas dendríticas, regula a plasticidade sináptica e a depressão de longo prazo dependente dos recetores NMDA (LTD).
• O PTEN é amplamente expresso nos tecidos adultos, incluindo coração, cérebro, placenta, pulmão, fígado, músculo, rim e pâncreas, refletindo os seus papéis reguladores fundamentais.
• Modificações pós-traducionais, como acetilação, ubiquitinação e fosforilação, controlam a atividade, estabilidade e localização subcelular do PTEN; o PTEN monoubiquitinado nuclear exibe um potencial apoptótico aumentado. Referências relacionadas: PMID:10468583 PMID:18716620

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 190–304) encontra-se nos domínios C2 e cauda do PTEN, uma região conservada entre humanos, camundongos e ratos, suportando a reatividade cruzada observada.
• Para IHC-P, otimize a recuperação de antígeno (por exemplo, recuperação de epítopo induzida por calor a pH 6 ou 9) e inclua controlos positivos (por exemplo, tecido da próstata ou da mama) e negativos (tumor deficiente em PTEN).
• Em IF/ICC, valide a coloração em linhas celulares conhecidas por expressarem PTEN (por exemplo, HeLa, MCF7) e espere localização nuclear/citoplasmática; realize co-coloração com marcadores de organelos conforme necessário.
• Para ELISA, considere usar o anticorpo para deteção de antígeno e titule cuidadosamente; o emparelhamento com um anticorpo de captura adequado pode permitir formatos sanduíche.
• Como um anticorpo policlonal, verifique a consistência entre lotes em aplicações críticas e use bloqueio de soro para reduzir o ruído de fundo.

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