Anticorpo Policlonal Anti-PTK6 para WB, IF/ICC, ELISA - Q13882

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PTK6

• PTK6 (Proteína-tirosina quinase 6), também conhecida como quinase de tumor de mama (BRK), é uma proteína quinase de tirosina não receptora de 52 kDa codificada pelo gene PTK6 (ID do Gene: 5753).
• Desempenha um papel dependente do contexto na regulação da diferenciação e manutenção de células epiteliais, promovendo apoptose em tecidos normais, enquanto aumenta a proliferação, sobrevivência e migração em ambientes tumorigênicos.
• Após estimulação com EGF, o PTK6 fosforila a ARAP1, o que retarda a regulação negativa do EGFR e sustenta a sinalização (PubMed:20554524). Referências relacionadas: PMID:20554524
• O PTK6 interage com membros da família EGFR (EGFR, ERBB2, ERBB3) e ativa vias a jusante, incluindo AKT, PI3K e STAT3/STAT5B, para impulsionar a sinalização oncogênica.
• A localização subcelular inclui o citoplasma, núcleo, membrana celular e bordas em dobras (ruffles), sendo o PTK6 nuclear ligado à regulação de crescimento em epitélios normais e o PTK6 citoplasmático à ativação oncogênica.
• É predominantemente expresso em tecidos epiteliais, com os níveis mais altos no cólon, e superexpresso em muitos cânceres, incluindo carcinomas de mama, ovário, cólon e próstata; não é encontrado no coração, cérebro, fígado ou músculo.
• Modificações pós-traducionais: classificado como uma fosfoproteína (palavras-chave UniProt) e regulado por interações intramoleculares e eventos de fosforilação que controlam sua atividade de quinase.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 222–451, o que inclui parte do domínio da quinase; o anticorpo pode reconhecer as formas fosforiladas e não fosforiladas, mas o mascaramento de epítopo por modificações pós-traducionais deve ser considerado em certas condições de ensaio.
• Para Western blot, uma banda de 52 kDa é esperada; use controles positivos, como lisados celulares de carcinoma de cólon humano (ex: HT-29) ou câncer de próstata (ex: LNCaP). Valide a especificidade com knockdown mediado por siRNA ou linhagens celulares knockout.
• Na imunofluorescência, o PTK6 pode se localizar tanto em compartimentos citoplasmáticos quanto nucleares; a permeabilização com 0,1–0,5% de Triton X-100 e uma fixação cuidadosa são recomendadas para evitar artefatos.
• Para ELISA, o fragmento de imunógeno recombinante pode servir como antígeno de revestimento positivo; inclua controles negativos apropriados para avaliar o fundo.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato é prevista com base na homologia de sequência; no entanto, verifique na espécie alvo usando tecidos relevantes ou lisados celulares.

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