Anticorpo policlonal de coelho anti-PTPN2 para WB, IF/ICC, ELISA - P17706

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da PTPN2

• A proteína-tirosina fosfatase não receptora tipo 2 (PTPN2), também conhecida como proteína-tirosina fosfatase de células T (TCPTP), é uma fosfatase não receptora específica de tirosina que desfosforila proteínas-tirosina quinases receptoras e não receptoras, incluindo INSR, EGFR, JAK1, JAK2, JAK3 e membros da família STAT, regulando negativamente múltiplas vias de sinalização.
• Desempenha um papel fundamental no desenvolvimento e na função do sistema imunológico, modulando o receptor de células T, a interleucina-2, o interferon e outras cascatas de sinalização de citocinas; variantes genéticas e a desregulação estão implicadas em doenças autoimunes e inflamação.
• É expressa ubiquamente, sendo a isoforma 1 encontrada principalmente em células T e na placenta, enquanto a isoforma 2 é a principal isoforma presente em muitos tecidos, destacando mecanismos regulatórios específicos de cada tecido.
• Localiza-se no retículo endoplasmático, no compartimento intermediário entre o retículo endoplasmático e o complexo de Golgi, no núcleo, no citoplasma e na membrana celular, permitindo o acesso dependente do contexto a diversos substratos e pontos de sinalização.
• Funciona como um regulador metabólico essencial ao desfosforilar o receptor de insulina (INSR) e controlar a produção hepática de glicose por meio da via IL-6/STAT3, relacionando-se à homeostase da glicose e ao diabetes tipo 2.
• O domínio catalítico da fosfatase é essencial para sua atividade hidrolase; modificações pós-traducionais, como fosforilação e S-nitrosilação, modulam sua função enzimática e distribuição subcelular.
• Possui um segmento C-terminal não catalítico que pode mediar interações proteína-proteína e o direcionamento subcelular, e foi relatado que se liga ao DNA, sugerindo funções nucleares adicionais além da atividade clássica de fosfatase.
• Como membro da família das proteínas-tirosina fosfatases, neutraliza a sinalização das tirosina quinases e participa da desfosforilação de alvos oncogênicos, como EGFR e Src, tornando-se relevante para a pesquisa em câncer.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 1-353 da PTPN2 humana (isoforma 1), incluindo o domínio catalítico; confirme a identidade da sequência entre o imunógeno e a proteína-alvo na espécie de interesse (humana, camundongo ou rato), alinhando o acesso NP_536348.1 ou UniProt P17706 com os ortólogos correspondentes.
• Para Western blot, utilize lisados de controle positivo de células T Jurkat humanas, baço de camundongo ou timo de rato, que expressam PTPN2; espere uma banda próxima a 48 kDa (a massa molecular prevista da isoforma 2 é de 48,5 kDa), com possíveis sinais adicionais devido a isoformas ou modificações pós-traducionais.
• Na imunofluorescência/imunocitoquímica, permeabilize as células adequadamente para detectar os reservatórios nucleares e citoplasmáticos; faça marcação dupla com marcadores de organelas (por exemplo, ER-Tracker e marcadores do Golgi) se estiver estudando a dinâmica do tráfego.
• Como anticorpo policlonal, pode reconhecer múltiplos epítopos; valide a especificidade utilizando silenciamento por siRNA ou linhagens celulares knockout para PTPN2 e compare com os padrões de expressão de bases de dados públicas, como o Human Protein Atlas.
• Para ELISA, otimize as condições de revestimento e a concentração do anticorpo; utilize proteína PTPN2 recombinante como padrão para garantir uma faixa de detecção linear.

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