Anticorpo Policlonado PUF60 de Coelho para WB, IP, ELISA - Q9UHX1

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PUF60

• PUF60 (fator de splicing de ligação a poli(U) de 60 kDa), também conhecido como FIR, RoBPI ou Siah-BP1, é uma proteína de ligação a DNA e RNA envolvida no splicing de pré-mRNA, apoptose e regulação transcricional.
• Ele atua como repressor transcricional por meio do complexo core-TFIIH, diminuindo a atividade da helicase ERCC3 e reprimindo a transcrição de MYC induzida por FUBP1 no promotor P2.
• No splicing de pré-mRNA, o PUF60 promove o splicing de íntrons com sítios de splicing 3' fracos e se liga à região do trato de pirimidinas e do sítio de splicing 3' de forma cooperativa com U2AF2.
• A isoforma 6, que é expressa em câncer colorretal mas não no epitélio normal, não consegue reprimir a transcrição de MYC e inibe a apoptose induzida por FIR, contribuindo potencialmente para a progressão tumoral.
• O PUF60 se localiza no núcleo e é amplamente expresso em vários tecidos, incluindo coração, cérebro, pulmão, fígado, rim e cólon.
• A proteína sofre modificações pós-tradução como acetilação e fosforilação, sendo um alvo conhecido de ubiquitinação (conjugação Ubl).

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um fragmento recombinante que cobre os aminoácidos 243–542 do PUF60 humano (NP_055096.2), localizado na região C-terminal contendo motivos de reconhecimento de RNA; esse design pode aumentar a especificidade.
• Para Western blot, considere usar um tampão de transferência padrão e otimize a diluição do anticorpo primário em uma faixa (por exemplo, 1:500–1:2000) com base no nível de expressão endógena na sua amostra.
• Na imunoprecipitação, o anticorpo pode capturar o PUF60 endógeno de lisados de células humanas, de camundongo ou rato; valide por co-imunoblotting com um anticorpo anti-PUF60 de um hospedeiro diferente.
• Para ELISA, a natureza policlonada pode fornecer amplificação de sinal robusta; combine com um anticorpo de detecção monoclonal correspondente para aplicações de sanduíche.
• Sempre inclua controles positivos e negativos adequados (por exemplo, lisado total de células HeLa para WB) para confirmar o desempenho do anticorpo.

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