Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Pumilio 1 para WB, IF/ICC, ELISA - Q14671

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Pumilio 1

• Proteína de ligação a RNA específica de sequência que reconhece o Elemento de Resposta a Pumilio (PRE) 5'-UGUANAUA-3' nas regiões 3'-UTRs dos mRNAs alvo. Referências relacionadas: PMID:18328718, PMID:21397187, PMID:21572425
• Atua como repressor pós-transcricional por meio de dois mecanismos principais: recrutamento direto do complexo de adenilação CCR4-POP2-NOT para degradação de mRNA, e facilitação da ligação de miRNAs aos sítios alvo (por exemplo, promovendo o acesso do miR-221/222 ao mRNA CDKN1B/p27 após fosforilação). Referências relacionadas: PMID:22955276, PMID:18776931, PMID:20818387, PMID:20860814
• Reprime mRNAs alvos chave incluindo E2F3 (envolvido na estabilidade genômica) e ATXN1 (ligado à função neuronal). Referências relacionadas: E2F3: PMID:22345517, PMID:29474920; ATXN1: PMID:25768905
• A atividade é regulada negativamente pelo RNA não codificante longo NORAD, que sequestra PUM1 no citoplasma para evitar a repressão de fatores mitóticos, de reparo de DNA e de replicação. Referências relacionadas: PMID:26724866
• Se localiza predominantemente no citoplasma, incluindo corpos P e grânulos citoplasmáticos.
• É expresso no cérebro, coração, rim, músculo, intestino, estômago e todos os tecidos fetais, mas não no cerebelo, corpo caloso, núcleo caudado, hipocampo, medula oblonga ou putâmen.
• Funções adicionais: detecção citoplasmática de infecção viral e regulação da biogênese do miRNA MIR199A (em cooperação com PUM2). Referências relacionadas: PMID:25340845, PMID:28431233

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blot, o peso molecular previsto é de 126 kDa; considere o uso de um gel de baixa porcentagem (por exemplo, 6–8%) e tempos de transferência estendidos para garantir uma detecção eficiente.
• Em imunofluorescência/ICC, pode ser necessária fixação adequada (por exemplo, paraformaldeído) e permeabilização (por exemplo, Triton X-100); valide a localização subcelular no seu modelo celular específico.
• O imunógeno abrange os aminoácidos 104–203; essa região é conservada entre humanos e camundongos, o que é consistente com a reatividade cruzada relatada; verifique a reatividade em outras espécies, se necessário.
• Para aplicações de ELISA, determine a diluição ótima do anticorpo por titulação em xadrez; inclua controles positivos e negativos adequados.

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