Anticorpo Policlonal Anti-PUS10 para WB e ELISA - Q3MIT2

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do PUS10

• PUS10 (também conhecido como DOBI, Hup10, CCDC139) é uma proteína multifuncional que atua como uma pseudouridilato sintase de tRNA no citoplasma e participa do processamento de pri-miRNA no núcleo, com papéis distintos dependendo de sua localização subcelular. Referências relacionadas: PMID:31819270 PMID:33023933
• No citoplasma, o PUS10 catalisa a conversão de uracila em pseudouridina nas posições 54 e 55 no loop Ψ GC de um subconjunto de tRNAs, uma modificação crítica para a estrutura e função do tRNA. Referências relacionadas: PMID:30530625 PMID:31819270 PMID:33023933
• A atividade de pseudouridilação do PUS10 é aumentada pela presença de 1-metiladenosina nas posições 53–61 do tRNA alvo, indicando um mecanismo regulatório dependente do contexto. Referências relacionadas: PMID:30530625
• No núcleo, o PUS10 liga-se a microRNAs primários (pri-miRNAs) e promove seu processamento de forma independente de sua atividade de pseudouridilato sintase, destacando um papel não catalítico na biogênese de miRNA. Referências relacionadas: PMID:31819270
• O PUS10 modula a apoptose induzida por TRAIL/TNFSF10 ativando a procaspase-8 e promovendo a clivagem de BID, e é necessário para a progressão através da via intrínseca de morte celular mitocondrial. Referências relacionadas: PMID:14527409 PMID:19712588
• Subcelularmente, o PUS10 localiza-se no núcleo, citoplasma e mitocôndrias, consistente com suas funções multifacetadas no processamento de RNA e sinalização de morte celular.
• A proteína contém domínios de hélice superenrolada (coiled-coil) e é anotada com palavras-chave incluindo atividade isomerase, ligação de metal, zinco, fosfoproteína e processamento de tRNA, refletindo suas características estruturais e enzimáticas.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno usado para este anticorpo (uma proteína de fusão recombinante que abrange os aminoácidos 290–529) cobre a região C-terminal do PUS10, o que pode ser útil na detecção de formas全长 e truncadas. Considere verificar a detecção da sua isoforma alvo no sistema de amostra relevante.
• Para Western blotting, o peso molecular previsto é de aproximadamente 60 kDa, mas modificações pós-traducionais ou processamento subcelular podem resultar em pequenos deslocamentos de bandas. A validação no seu lisato específico de células ou tecidos é recomendada.
• As aplicações de ELISA podem ser otimizadas usando o anticorpo com PUS10 recombinante ou fragmentos de peptídeos. A reatividade cruzada com camundongo e rato sugere utilidade em estudos comparativos; no entanto, titulação experimental e controles são aconselhados.
• Como as funções do PUS10 diferem entre núcleo e citoplasma, ensaios de fracionamento ou imunofluorescência podem ser informativos se estiver explorando a localização subcelular; note que este anticorpo não foi validado para IF ou IHC e exigiria testes independentes.

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