Anticorpo Policlonal de Coelho Anti-PXDN para WB e ELISA - Q92626

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Peroxidasin Homólogo (PXDN)

• O peroxidasin homólogo (PXDN) é uma peroxidase secretada contendo heme que pertence à família das peroxidases, também conhecido como antígeno associado ao melanoma MG50, peroxidase vascular 1 e proteína do gene responsivo a p53 2.
• O PXDN catalisa a oxidação de dois elétrons do brometo pelo peróxido de hidrogênio para gerar hipobromito, que medeia a formação de ligações cruzadas de sulfilimina entre resíduos de metionina e hidroxilisina nos hexâmeros NC1 do colágeno IV, essencial para a montagem da rede de colágeno IV. Referências relacionadas: PMID:18929642, PMID:19590037, PMID:22842973
• Essas ligações cruzadas de sulfilimina são fundamentais para a montagem dependente de colágeno IV de fibronectina e laminina, e para a sinalização completa mediada pela matriz extracelular (MEC), incluindo a proliferação celular induzida por fatores de crescimento e a sobrevivência em células endoteliais, contribuindo assim para a integridade da membrana basal. Referências relacionadas: PMID:19590037, PMID:32543734, PMID:34679700
• O PXDN também pode promover a tubulogênese e a angiogênese pelas vias ERK1/2, Akt e FAK. Referências relacionadas: PMID:25713063
• Além disso, o PXDN broma a cadeia alfa2 do colágeno IV na Tyr-1485, levando ao enriquecimento de bromo nas membranas basais. In vitro, ele pode oxidar tiocianato e iodeto, que podem competir com o brometo e inibir a formação da ligação de sulfilimina. Referências relacionadas: PMID:32571911, PMID:28154175
• O PXDN é expresso em vários tecidos, com níveis mais elevados em coração, pulmão, ovário, baço, intestino e placenta, e níveis mais baixos em fígado, cólon, pâncreas, rim, timo, músculo esquelético e próstata. Também é expresso em vários tumores, incluindo melanoma, câncer de mama, câncer de ovário e glioblastoma.
• Subcelularmente, o PXDN se localiza no retículo endoplasmático e é secretado para o espaço extracelular, se incorporando à matriz extracelular e à membrana basal.
• A proteína contém repetições ricas em leucina, domínios de imunoglobulina e um domínio de peroxidase; ela se liga a heme, cálcio e lamininas. Variantes patogênicas e splicing alternativo implicam o PXDN em processos de desenvolvimento e doenças. Referências relacionadas: PMID:32485152

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 1320–1479 próximos ao terminal C do PXDN humano; essa região pode permitir a detecção de formas completas e algumas formas processadas. Recomenda-se validar a detecção da isoforma alvo no seu sistema de amostras relevante.
• Para WB, o peso molecular previsto é de aproximadamente 165 kDa; o uso de um gel de acrilamida de baixa porcentagem e tempos de transferência estendidos podem melhorar a resolução e a eficiência de transferência para proteínas de alto peso molecular.
• O anticorpo apresenta reação cruzada com o PXDN de camundongo, podendo viabilizar estudos em modelos murinos. No entanto, confirme a reatividade na sua configuração experimental.
• Para ELISA, realize a titulação do anticorpo contra o imunógeno ou a proteína nativa para estabelecer as concentrações de trabalho ideais; anticorpos policlonais podem exigir otimização do bloqueio para minimizar o ruído de fundo.

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